目的:基于液质联用技术和网络药理学探讨薯蓣丸治疗肝癌的潜在作用机制,构建“药物成分-靶点-作用通路”网络。进行动物实验验证,从抑制糖酵解和免疫逃逸等方面验证薯蓣丸通过多靶点、多途径干预肝癌的作用机制。方法:1.通过液质联用技术（U P LC-TO F-M S/M S）对薯蓣丸进行系统的化学成分分析,明确中药复方薯蓣丸的主要化学成分群,再根据其检测到的化学成分基于TCMSP和TCMID数据库,检索收集“薯蓣丸”中活性成分的相关化合物成分及对应靶点。同样的,通过TCMSP、OMIM两个数据库检索并筛选出肝癌的相关靶点,通过Venny2.5在线软件将药物靶点与疾病靶点取交集绘制韦恩图,将交集得到的共同靶点构建蛋白-蛋白互作网络（PPI）网络,并通过Cytoscape对PPI网络进行拓扑结构值计算,完成网络可视化分析。取药物及活性成分靶点和疾病靶点绘制药物-活性成分-对应靶点网络。最后通过R软件对关键靶蛋白进行KEGG富集通路分析、GO分析,研究其作用机制。2.制备裸鼠人肝癌皮下移植瘤（H e p G 2细胞）模型,雄性B A LB/c裸鼠（n=24,5周龄,15±g）,依据随机原则分为4组,每组6只:模型组（0.9%生理盐水0.2ml/d）、薯蓣丸组（中药液20g/kg）,薯蓣丸+索拉非尼组（中药液20g/kg+索拉非尼10mg/kg）,索拉非尼组（索拉非尼1 0m g/k g）。每只裸鼠灌胃剂量为0.2 m l/d,每2 d测量一次肿瘤体积,连续干预21d后脱颈处死,剥离皮下移植瘤。活性氧指示剂检测肿瘤组织中ROS水平;乳酸、ATP、葡萄糖检测试剂盒检测肿瘤组织中乳酸、ATP、葡萄糖的水平;ELISA法检测肝脏、脾脏组织中CD56、TCRαβ-CD3、C XC R 6、IF N-γ含量;RT-q P C R法对G LU T 1、H K 2、P KM 2、C D 5 6、T C Rαβ-C D 3、C X C R 6、IF N-γ进行实时荧光定量检测基因m R N A表达水平,Western Blot方法检测GLUT1、HK2、PKM2蛋白表达情况。结果:1.基于U P LC-TO F-MS/M S分析薯蓣丸颗粒原药鉴定出活性成分共1 0 8种,通过筛选交集获得6 9个靶点薯蓣丸与肝癌的共同靶点,出现频次较高的有ICAM1、CASP3、CAT、CXCL8、FOS、MYC、IL6、INS、P T G S 2、E S R 1、P PA R G、IL1 B、V E G FA等,提示薯蓣丸可能通过这些靶点发挥对炎症、缺氧及其反应、血管调节等生物过程的作用。薯蓣丸可能主要通过EGFR酪氨酸激酶抑制剂抗性、HIF-1信号通路、IL-17信号通路、MAPK信号通路等方面治疗肝癌。2.与模型组相比,薯蓣丸可抑制裸鼠人肝癌皮下移植瘤的生长,降低裸鼠人肝癌皮下移植瘤中ROS、GLUCOSE、ATP、LA含量;抑制糖酵解基因HK2、GLUT1表达,同时提高NK细胞相关指标CD56、CXCR6、IF N-γ、TCRαβ-C D 3的表达。与索拉菲尼联合后对裸鼠人肝癌皮下移植瘤的抑制作用更强,且明显下调了糖酵解基因HK2、GLUT1的表达。结论:通过UPLC-TOF-MS/MS、网络药理学及体内实验发现薯蓣丸可抑制裸鼠人肝癌皮下移植瘤的生长,其机制可能为通过HIF-1α信号通路改善肿瘤微环境缺氧抑制糖酵解,提高NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,抑制肿瘤细胞发生免疫逃逸反应,从而发挥治疗肝癌的作用。