水稻OsFTL11基因的功能研究

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开花是高等植物从营养生长向生殖生长转变的重要生理过程。OsFT-LIKE基因家族在水稻成花诱导中具有重要作用。本论文对水稻OsFT-LIKE基因家族中的OsFTL11的功能进行了详细研究,获得以下主要研究结果:  1、FT11对水稻抽穗时间和株型影响显著。反义抑制FT-L11表达提前约4天(p35S∷反FT11)抽穗;超表达FT-L11推迟约5天抽穗(p35S∷ FT11、pUBI∷FT11)、p35S∷ FT11∶GFP、pFT11∷FT11∶GFP晚花明显,大于两周;p35S∷FT11∶GUS∶GFP、pFT11∷FT11∶GUS∶GFP与野生型基本一致。相对于野生型,p35S∷ FT11∶GFP转基因植株植株高大,茎秆粗壮,稻穗分支及穗粒增多,穗颈和旗叶维管束增多,出现大穗表型。p35S∷ FT11∶GFP转基因植株的叶绿素和可溶性蛋白含量在抽穗后29 d时出现了回升,淀粉积累量增加而可溶性糖含量下降,游离氨基酸逐渐下降而谷氨酰胺合成酶活性逐渐增加。  2、表达谱分析野生型和p35S∷ FT11∶GFP转基因植株旗叶和幼穗转录调控变化,在代谢通路方面:在旗叶中,转基因植株中表达量上调的基因主要在光合作用——天线蛋白、谷胱甘肽代谢、植物昼夜节律和氮素代谢通路富集;幼穗中,主要是与淀粉和蔗糖代谢有关的基因出现上调。在开花通路方面:在旗叶和幼穗中,OsCO3、OsHAP3表达都有不同程度的上调。OsCCA1、OsID1/Ehd2、OsMADS55、Hd3a和RFT1基因在旗叶中表达上调,而Hd1、ELF3、PHYB和OsMADS22基因表达下调;幼穗中,OsRCN2基因表达明显高于野生型,而转录因子FD表达有所下调。油菜素内酯合成通路中相关基因表达明显出现上调。  3、半定量PCR检测野生型及OsFTL11转化株旗叶和幼穗开花调控网络基因的表达量:OsMADS51,OsMADS56表达量都比较低,而OsCCA1,OsMADS50,Ehd1,OsGI表达较野生型基本上都没有差别,OsMADS15,Hd3a两个基因在p35S∷ FT11∶GFP转基因植株中表达稍高,而OsCO3,Ghd7,LFL1,OsRCN2,RFT1这5个基因表达明显高于野生型。p35S∷ FT11∶GFP转基因植株幼穗中OsRCN2基因表达量明显上升,而其余基因,如OsMADS14,OsMADS15,Ehd1,Hd3a,RFT1表达都与野生型没有明显的差别。  4、酵母双杂交结果,FT11与Hd3a类似,可与14-3-3蛋白发生作用,不同的是FT11也可直接与OsFD1发生相互作用,初步推测FT11可能与Hd3a作用方式类似,且和Hd3a竞争OsFD1,调控下游开花基因,推迟开花。具体还需进一步研究。  
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