基于功能金银纳米簇的医学荧光传感新技术

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金纳米簇(AuNCs)和银纳米簇(AgNCs)等贵金属纳米材料因具有超小尺寸、优良发光特性、高生物相容性等优点,已成为多个领域的研究热点。同时,金属有机骨架(MOFs)材料具有多孔结构、比表面积大、孔道可调等优点,在储能、分离、催化、药物载体以及传感检测等领域应用广泛。本文通过合成金银纳米簇荧光材料,进而分别与溶剂化效应、微井阵列、酶催化作用以及MOFs材料的封装功能相结合,建立了三种高性能的荧光传感检测平台,分别实现了尿碘、微小RNA(miRNA)和血糖等疾病标志物的高效分析。主要研究内容包括:(1)建立了一种基于醇溶剂诱导的银簇荧光增强的尿碘荧光分析方法(第二章)。以二氢硫辛酸为还原剂,于水介质中制备了红色荧光AgNCs材料,并系统地考察了不同溶剂对其荧光特性的影响。结果表明,醇溶剂特别是异丙醇不仅可显著增强银簇的荧光强度,而且使之获得了对碘离子的特异性识别能力,由此发展了一种基于醇溶剂诱导银簇荧光增强的碘离子荧光检测技术,成功地实现了尿液中碘离子的快速、特异、灵敏的分析,检测限为7.5 nM,可望应用于临床尿碘的高灵敏检测。(2)发展了一种基于微井阵列的miRNA荧光分析技术(第三章)。通过“step-by-step”的制备工艺在疏水性基底表面构建了氨基衍生化的亲水性微井阵列,用以共价锚定末端带有可结合银的鸟嘌呤G序列的DNA捕获探针,经与目标miRNA杂交后,采用核酸外切酶I催化剪切其中未杂交的单链DNA探针,进而借助探针上鸟嘌呤G序列对银的特异结合作用引入荧光AgNCs,然后通过覆盖MOFs材料稳定并放大其荧光信号,实现了对目标物miRNA的超灵敏传感分析。由此建立的微井阵列荧光传感平台,对血液中miRNA的检测线性范围为0.25 pM~500 pM,检测限为5.0 fM,可望应用于临床实验室miRNA的高通量检测,用于肿瘤早期诊断及其转移预警。(3)建立了一种基于MOFs封装金纳米簇和葡萄糖氧化酶(GOD)的血糖荧光分析法(第四章)。通过仿生矿化途径制得强红色荧光AuNCs,进而与GOD结合并封装于多孔ZIF-8材料中,制得GOD-AuNCs@ZIF-8荧光探针,然后,将之固化于毛细管内壁,并借助毛细现象自动吸取血液样品,进而利用GOD-AuNCs@ZIF-8中的GOD催化血样品中的血糖产生双氧水,导致其中AuNCs荧光猝灭,实现了血糖的快速、特异、灵敏的传感检测,检测限达到了0.30?M,可望应用于临床血糖的快速分析。
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