【摘 要】
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该研究从基质细胞原代及传代培养、细胞转染和实验动物模型三方面研究MMPs及其抑制剂与角膜的关系,以求为角膜新生血管的基因治疗提供新的靶点.第一部分:体外培养兔角膜基质
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该研究从基质细胞原代及传代培养、细胞转染和实验动物模型三方面研究MMPs及其抑制剂与角膜的关系,以求为角膜新生血管的基因治疗提供新的靶点.第一部分:体外培养兔角膜基质细胞其基质金属蛋白酶的表达及调节.目的:观察培养的兔角膜基质细胞MMPs的表达及在炎性介质下表达的变化.结论:角膜炎症反应中,炎症介质可调节基质细胞表达MMPs,可能是炎性角膜新生血管产生的一种重要调控因素.第二部分:转TFPI-2基因兔角膜基质细胞基质金属蛋白酶的表达.目的:组织因子途径抑制物2(tissue factor pathwayinhibitor-2,TFPI-2)是一种新近发现的丝氨酸蛋白酶抑制物,在维持细胞外基质完整性和抑制肿瘤转移、浸润有重要的作用.该研究旨在探讨角膜基质细胞TFPI-2的表达及转染前后基质细胞表达基质金属蛋白酶的变化情况,为角膜新生血管的基因治疗提供方法.结论:培养角膜基质细胞可基础表达一定量的TFPI-2,转染TFPI-2质粒后使基质细胞TFPI-2 mRNA和蛋白质的表达增高,转染后基质细胞其MMP1,2的活性,尤其是MMP1的活性下降,从而为开展角膜新生血管的基因治疗提供实验依据.第三部分:转TFPI-2基因对兔角膜新生血管形成的影响及机制探讨.目的:观察局部转染TFPI-2基因对实验兔角膜新生血管形成的抑制作用,及对其基质金属蛋白酶表达的影响.结论:局部转染FFPI-2基因可抑制兔角膜新生血管的发生及发展,质粒PEF-BOS-TFPI-2含有TFPI-2基因,转染的角膜基质细胞表达TFPI-2升高,通过抑制MMPs的活性而阻止ECM的降解,从而为角膜新生血管的基因治疗提供实验依据.
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目的:该实验采用全细胞膜片钳技术并结合药理学方法,以兴奋性突触后电流(excitatory postsynaptic current,EPSC)和自发性兴奋性突触后电流(miniature excitatory postsynapt
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