目的:探究NVP-BEZ235与CQ联用对三阴乳腺癌细胞增殖和转移的抑制作用及其分子机制。方法:MTT法和克隆集落形成实验检测NVP-BEZ235、CQ及两药合用对三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞增殖的影响;用Chou-Talalay方法计算联合用药指数(combination index,CI);采用免疫荧光染色实验观察细胞内自噬小体的形成情况;Hoechst33342染色观察用药后三阴乳腺癌细胞内亮蓝色凋亡小体的数量;Transwell小室迁移实验和划痕愈合实验检测NVP-BEZ235与CQ单独或者联合用药对MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞的横向和纵向迁移能力的影响;蛋白印迹实验检测凋亡相关蛋白、EMT标志物蛋白、自噬相关蛋及Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结果:1.MTT实验结果显示,NVP-BEZ235与CQ联合用药对三阴乳腺癌细胞的抑制作用较单独用药组更为明显,两药联合应用时对MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞的48h抑制率分别为49%、51%(P<0.01);2.两药的CI值均<1,具有协同作用:3.克隆集落形成实验结果显示,与单独用药组相比,NVP-BEZ235与CQ联合应用对三阴乳腺癌细胞增殖的抑制作用更为明显(P<0.01);4.免疫荧光染色实验结果显示,与单独用药组相比,联合用药组细胞胞浆中绿色荧光颗粒明显增多;5.Hoechst33342染色结果显示,两药联合使用组的细胞中亮蓝色的凋亡小体数量明显多于单独用药组;6.Transwell小室迁移实验和划痕愈合实验结果显示,联合用药组细胞的纵向和横向迁移能力与单独用药组相比明显受到抑制(P<0.01);7.蛋白印迹实验结果显示,自噬标志蛋白LC311、p-62在联合用药组中的表达明显上调;凋亡标志蛋白Cleavedcaspase 9、Cleaved PARP、Cleaved caspase 3 和 Bax/Bcl-2 的比值明显上调;上皮标志物 E-cadherin的表达水平显著上调,间充质标志物Vimentin、Slug、Snail蛋白表达水平均下调;Akt/mTOR信号通路相关蛋白p-Aktser473、p-4EBP1、p-S6的水平明显降低。结论:1.NVP-BEZ235与CQ联用可通过阻断自噬流过程,促进三阴乳腺癌细胞的凋亡、抑制肿瘤细胞增殖和迁移;2.NVP-BEZ235与CQ联用抗三阴乳腺癌细胞的机制与调控Akt/mTOR信号通路及EMT过程相关。