肠道真菌菌群失调对小鼠角膜创伤修复的影响

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目的本研究旨在观察抗真菌药物诱导的肠道真菌菌群失调对小鼠角膜创伤修复的影响。方法裂隙灯显微镜下选取健康无眼疾的C57BL/6J雄性小鼠80只,随机分成两组:两性霉素B组(Amph组)40只小鼠和正常对照组(Ctrl组)40只小鼠,两性霉素B组小鼠给予添加两性霉素B的饮食,正常对照组小鼠给予正常饮食。喂养4周后分别采集两组小鼠粪便样本进行肠道真菌ITS测序,明确肠道真菌菌群失调情况后分别对两组小鼠进行角膜上皮创伤。小鼠麻醉后,在解剖显微镜下利用直径2mm环钻在两组小鼠角膜中央的圆形区域标记,用高尔夫刀机械性的去除角膜上皮层。创伤后利用2%荧光素钠溶液染色角膜上皮创伤区域,动态观察角膜上皮创伤修复情况,并进行免疫荧光染色观察并定量统计角膜上皮分裂细胞、γδT细胞及中性粒细胞的变化,通过角膜组织病理切片HE染色进一步观察角膜形态学及角膜上皮层厚度的变化。结果Amph组与Ctrl组相比:1、两性霉素B处理后导致小鼠肠道真菌菌群失调;2、Amph组创伤后0h、6h、12h、18h、24h、30h、36h、42h分裂细胞数目均较Ctrl组减少,再上皮化速度及创伤修复延迟,各时间点P<0.05,差异具有统计学意义;3、Amph组角膜创伤后γδT细胞、中性粒细胞均明显减少,两组比较P<0.05;4、角膜创伤后24h、48h、96h,Amph组角膜上皮层厚度变薄,均为P<0.05,各时间点差异均有统计学意义。结论肠道真菌菌群失调导致小鼠角膜创伤后再上皮化速度延迟,降低角膜创伤后的炎症反应,降低角膜创伤后修复能力,使角膜上皮层厚度变薄。
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