细胞周期相关蛋白ZYG11A促进肺腺癌恶性进展的机制研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:saarelff
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第一部分:ZYG11A在非小细胞肺癌中被识别为一个潜在的癌基因目的:肺癌目前是全世界最流行的肿瘤,每年造成大量患者死亡。即使患者接受了规范化治疗,在大多数国家里五年生存率仍然小于15%。因此寻找肺癌相关标记物和治疗靶点显得尤为重要。近年来随着高通量测序技术的发展与普及,以及许多公开肿瘤学数据库的涌现,使得这项工作显得更为方便简单。方法:通过使用TCGA的肺癌,肺腺癌,肺鳞癌数据库从约20000个基因中筛选差异表达最大的基因。对于肿瘤和瘤旁差异表达大于5倍的和肿瘤中表达大于3的基因再进行文献阅读筛选。之后使用The Human Protein Atlas评估筛选出来的基因在组织中蛋白表达情况。结果:通过TCGA数据库的筛选,我们一共识别出了7个符合条件的基因,通过在PubMed和谷歌学术上检索我们发现PITX2, HOXC13和BARX1都属于转录因子,并且在肿瘤中已经被很好的研究过了。DLL3作为一个Notch的配体在肿瘤中也被研究过了。LOC100131726是一个长链非编码RNA。IL1F5属于白介素1家族在牛皮癣的发病中被广泛研究。只有ZYG11A目前被研究甚少。第二部分:ZYG11A在非小细胞肺癌中的体内外功能实验和相关机制探索目的:根据之前的分析,ZYG11A可能是一个潜在的癌基因,本研究旨在探索ZYG11A和非小细胞肺癌相关恶性表型的关系及其可能机制,为肺癌防治提供潜在新靶点。方法:首先使用qRT-PCR和Western blot检测ZYG11A在各个细胞中的表达情况,并选择合适的细胞系进一步进行相关表型研究。我们选择H1299和SPC-A-1进行了相关的体内外表型研究。设计特异性siRNA干扰ZYG11A的表达,之后检测细胞的增殖,迁移,侵袭能力,以及凋亡情况和细胞周期分布。结果:我们发现在体内外干扰ZYG11A的表达可以显著的抑制肿瘤细胞的相关恶性表型,影响到CCNE1的表达,从而导致肿瘤细胞的G1期阻滞,我们通过拯救试验过表达CCNE1可以恢复肿瘤的相关恶性表型。第三部分:ZYG11A在非小细胞肺癌中的预后价值目的:探索ZYG11A在肺癌中是否可以作为一个独立的预后因素,并且探索ZYG11A和其他临床参数之间的相关性。方法:我们使用了90对来自于上海芯超公司的非小细胞肺癌组织芯片进行ZYG11A的免疫组织化学染色。染色后对染色结果进行评分,然后运用相关的统计学方法探索ZYG11A的表达和患者预后及临床参数之间的关系。结果:我们发现在肺癌组织中ZYG11A的表达明显高于瘤旁正常组织的表达,和更高级别的T分期和TNM分期相关;并且可以作为一个独立的预后因素。
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