在植物的生长过程中,会经常遇到干旱、盐、高温、冷以及病虫害等逆境胁迫,造成植物细胞不同程度的损伤,严重时可导致植株死亡。为了在多种不利条件下生存,植物在不断进化中形成了一系列的应答机制。研究植物响应非生物胁迫的分子机制,对于提高植物的耐受性以及干旱和半干旱地区的农业生产有至关重要的作用。TaGAPC5作为GAPDH基因家族在细胞质中的一员,对于多种非生物胁迫均有一定的响应。为探索TaGAPC5启动子区域的调控机制,本文以TaGAPC5启动子序列片段为靶基因,通过生物信息学软件对长武134小麦TaGAPC5基因启动子序列进行预测和分析,发现该启动子与逆境相关的顺式作用元件有:茉莉酸甲酯类响应元件(TGACG-motif)、干旱诱导响应元件(MBS)、脱落酸诱导响应元件(ABRE)、高温诱导响应元件(HSE)等。根据小麦TaGAPC5启动子上顺式作用元件的分布情况,设计了5对引物,成功构建五个诱饵载体。在自激活性验证后在小麦全长均一化文库中筛选与TaGAPC5启动子序列互作的蛋白,经过多次鉴定和PCR验证后筛选得到60个阳性克隆。将阳性克隆送去测序,测序结果中有三个为转录因子或可能为转录因子的蛋白,分别是锌指蛋白PHD finger protein ALFIN-LIKE 5、核转录因子Nuclear transcription factor Y subunit B-10、LEA蛋白WCOR410b,经反向验证后初步验证三个蛋白能够与TaGAPC5启动子序列结合,参与调控GAPDH表达,可能的调控机制还需要进一步实验验证。以上结论为GAPDH响应非生物胁迫的分子机制的深入探索奠定了基础。