仙人掌果多糖的结构表征、理化性质及抗氧化活性研究

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本文以海南三亚野生仙人掌的果实为原料,提取得到的仙人掌果多糖为研究对象,对仙人掌果多糖的理化性质、初级与高级结构特征和体外抗氧化活性进行了探讨。首先采用水提醇沉法,从仙人掌果果肉的水提浓缩液60%乙醇沉淀物中得到粗多糖,粗多糖经过脱色脱蛋白后,再经过DEAE-52纤维素和Sephacryl S-400凝胶柱层析进一步分离纯化,最终获得一个均一的酸性多糖组分(OFPP)。通过HPGPC、UV、XRD、TG-DSC、SEM、Raman光谱仪、Zeta电位仪和流变仪等技术手段研究了多糖组分OFPP的理化性质,结果表明OFPP分子量约为1.98×106Da,多糖含量达到82.4%±0.95,糖醛酸含量34.29%±1.74,不含蛋白质和核酸,Zeta电位为-24 mV,呈现假塑性行为,是典型的非牛顿性流体。结果还表明OFPP表面形态为宽松的片状,呈现半结晶状,并且具有良好的热稳定性。其次通过GC、GC-MS、FT-IR、NMR、刚果红实验、圆二色谱、TEM和AFM等技术手段研究了OFPP的初级结构和高级结构。结果表明,其主要由鼠李糖(40.8%)、半乳糖(34.5%)、阿拉伯糖(14.4%)、葡萄糖(5.9%)、岩藻糖(1.8%)、木糖(1.6%)和甘露糖(1%)等组成。OFPP可能是一种类果胶多糖,推测的结构是主链由→2)-α-L-Rhap-(1→4)-α-D-GalpA-(1→组成,同时在α-L-Rhap的O-4位置被中性糖α-L-Araf、α-D-Galp和α-D-Glcp部分取代作为支链。OFPP在水溶液中缺乏三股螺旋构象,可能呈现球状构象。Ca2+络合效应能强烈地改变多糖分子构象。TEM和AFM进一步证实了OFPP在水溶液中存在分子球状构象,并且单一分子直径约为26nm,高度约为5.9nm。本文还研究了仙人掌果多糖的体外抗氧化活性包括羟基自由基(·OH)清除能力、总还原力和金属Fe2+离子螯合能力的测定。结果表明仙人掌果多糖具有一定的清除羟基自由基能力、还原力和金属Fe2+离子螯合能力。
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