【摘 要】
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牛病毒性腹泻（bovine viral diarrhea,BVD）又称黏膜病（mucosal disease,MD）,由牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）引起的一种严重危害我国养牛业发展的重要传染病,其感染宿主谱广,流行范围大。国内于上个世纪80年代首次由李佑民等报道了该病后,其他学者也相继报道了BVD的流行。随着国内养牛业的快速发展,国家对BVD
【基金项目】
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“十三五”国家重点研发计划资助项目（2016YFD0500904、2017YFD0500104）; 国家自然科学基金资助项目（31572531）
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牛病毒性腹泻（bovine viral diarrhea,BVD）又称黏膜病（mucosal disease,MD）,由牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）引起的一种严重危害我国养牛业发展的重要传染病,其感染宿主谱广,流行范围大。国内于上个世纪80年代首次由李佑民等报道了该病后,其他学者也相继报道了BVD的流行。随着国内养牛业的快速发展,国家对BVD的防控也越发重视,并逐渐将流行病学调查与净化纳入到该病的综合防控中去。流行病学调查是牛病毒性腹泻防控与净化的关键与前提,而净化是防控与消灭BVD的重要手段之一,也是防控该病的最终目标。本研究旨在了解近年来吉林省牛病毒性腹泻的流行病学情况,通过检测与淘汰牛群中BVDV持续性感染牛,达到控制与净化该病流行的效果,并为吉林省乃至全国BVD的防控提供示范。本研究内容包括如下:运用检测BVDV抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒,对吉林省部分地区牛场进行了BVD流行病学调查,采取了796份粪便样品用于抗原检测;其检出率为3.45%～42.65%。该结果补充了国内BVD的流行病学数据,为选择BVD净化的净化牛场提供依据。对采集于目标净化牛场的7645份血清样品进行BVDV感染的本底调查,对采集于不同季节、年龄牛群样品的检测结果进行了分析,显示净化牛场BVDV平均检出率为12.22%（934/7645）,其中犊牛、育成牛、青年牛及成年牛BVDV抗原检出率分别为4.73%、8.35%、9.38%及17.29%。对不同季节采集的样品进行检测,结果显示冬季（12月～次年2月）采集样品BVDV抗原检出率最高,为14.06%。上述结果表明不同季节、年龄的牛群其BVDV感染存在差异性。对检测为BVDV阳性的动物,采用隔离饲养,间隔21天后再重复检测两次,三次检测结果均为阳性的动物判为BVDV持续性感染动物（persistent infection,PI）,并对其采用淘汰处理;隔离期间阳性转为阴性的动物,判为康复牛。经过长达一年的监测及淘汰PI动物,该净化牛场BVDV检测率逐渐下降,从12.22%降至0.22%,累计净化PI牛514头,净化牛场取得了良好的净化效果。同时,应用MDBK细胞对73份阳性样品进行了病毒分离,并对分离毒株的免疫学特性、生物型与遗传变异进行了研究。结果显示,从BVDV感染牛中成功分离获得了10株BVDV新毒株,生物学特性鉴定结果表明,10株BVDV中4株为CP型,6株为NCP型毒株。以IPMA对分离毒株进行了鉴定,结果显示分离毒株与BVDV CC13B毒株之间存在免疫交叉反应。基因序列比对分析结果显示,分离毒株的5’UTR基因与2019BVDO4882毒株（Gen Bank:MW528231.）同源性高达96.8%～97.6%;Npro基因与2019BVDO4882毒株同源性为93.39%～95.8%。以5’UTR序列进行系统进化树分析发现,感染净化牛场的BVDV毒株为BVDV-1d基因亚型。上述结果揭示出净化牛场BVDV毒株的核苷酸序列具有很高的同源性,可能源自于同一BVDV毒株。此外,本研究同时对净化牛场牛病毒性腹泻病毒及牛肠道病毒混合感染进行了检测,结果显示BVDV单一检出率为10.12%;其与BEV混合检出率为2.10%,该结果揭示出牛场存在BVDV与BEV混合感染,为牛腹泻性疫病今后的防控及净化打下基础。
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