ApNPV多角体理化特性及重组ApNPV转移载体的构建

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cyld2006_ldcy
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该研究首先对柞蚕核型多角体病毒多角体的理化特性进行研究,其次,对构建重组柞蚕核型多角体病毒转移载体进行了探索.在研究中,首先以低分子量标准蛋白为标记,利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,测定了野生型核型多角体病毒(ApNPV)和克隆型核型的多角体病毒(ApNPV,A)多角体蛋白的分子量,并对二者的分子量进行了比较.在构建重组柞蚕核型多体病毒转移载体的研究中,该研究利用质粒p为媒介,首先将鲤鱼生长激素基因从质粒cGH2.4上切下,组入p中,然后用限制性内切酶BamH I酶切p与pApCHⅡ,用T<,4>DNA连接酶连接鲤鱼生长激素基因cGH片段与线状质粒pApCHⅡ,以期建立重组柞蚕核型多角体病毒转移载体cGH-pApCHⅡ通过琼脂糖凝胶电泳重组质粒初步确认重组cGH-pApCHⅡ存在,再经酶切分析,验证了重组柞蚕核型多角体病毒转移载体cGH-pApCHⅡ建成,这将为构建含有鲤鱼生长激素基因cGH的重组柞蚕核型多角体病毒(rApNPV),并用其在柞蚕蛹中大量生产鲤鱼的生长激素奠定良好的理论基础.
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