清肝利水方抑制SD大鼠慢性青光眼视神经节细胞凋亡基础研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lomon521mutou
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目的:  青光眼视神经病变是一种常见的眼科疾病,主要是由高眼压引起并伴有视网膜神经节细胞(RGC)凋亡。我们需要找到一种对青光眼中RGC的凋亡具有神经保护作用的药。清肝利水方治疗青光眼已经在临床上运用了几十年了,且取得了一定的疗效,本课题旨在通过实验研究进一步验证清肝利水方对青光眼RGC凋亡的保护作用。  方法:  1.我们通过在SD大鼠前房角注射超顺性氧化铁磁珠(SIO)建立了一种可以维持稳定高眼压的SD大鼠慢性青光眼模型。  2.运用不同的干预措施,在不同的时间点检测SD大鼠眼内压值的变化。  3.通过注射霍乱毒素B亚基(CTB)于上丘脑逆向标记慢性青光眼及正常组模型中存活的RGC细胞。  4.运用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL法)测定凋亡的RGC细胞。  5.通过角巩膜缘注射SIO建立稳定的SD大鼠慢性青光眼模型后,将SD大鼠随机分为3组,Control组(空白组)、COH组(模型组),TCM组(中药组),每组30只。给药时间为造模后第1天,分别于药物干预后7、14、21、28天对各组小鼠分别进行CTB上丘脑逆标和TUNEL细胞凋亡检测试验。  结果:  1.通过前房角注射SIO建立了稳定的慢性高眼压模型(眼内压持续四周≥12mmhg)  2.SIO造模的SD大鼠灌服清肝利水方后,自术后第14-28天的眼压值与未灌中药的SD大鼠相比具有下降(p<0.001)  3.CTB逆标检测结果显示SIO注射后存活的RGC细胞数与正常组SD大鼠相比自术后第14-28天具有显著下降(p<0.001)。而中药组与正常组SD大鼠相比自术后第7-28天的RGC存活数无显著性差异(p>0.05)。  4.TUNEL细胞凋亡检测结果显示中药组SD大鼠的RGC细胞数与正常组SD大鼠相比自术后第14-28天具有显著下降(p<0.05)。中药组与模型组SD大鼠相比自术后第14-28天的RGC凋亡数也具有显著性差异(p<0.05)  结论:  清肝利水方可以抑制慢性青光眼引起的RGC凋亡保护视神经。
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