转Bt/CpTI双价抗虫基因水稻对土壤微生物多样性的影响

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转基因作物的生态安全一直是人们关心的热点问题之一。本课题以不同水稻为材料,比较分析了转Bt/CpTI基因水稻对土壤养分和土壤酶活性的动态变化,并应用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析了转Bt/CpTI基因水稻对土壤相关微生物群落多样性的影响。研究结果总结如下:转Bt/CpTI基因水稻对土壤养分的影响。种植Bt/CpTI水稻的土壤与非转基因水稻土壤相比,土壤中pH、速效氮、速效磷和速效钾的含量差异均未达显著水平。说明种植转Bt/CpTI水稻对土壤养分含量没有影响。   转Bt/CpTI基因水稻对土壤酶活性的影响。水稻生长前期Bt/CpTI水稻科丰8号土壤脲酶活性显著低于非转基因野生型水稻明恢86和非转基因杂交稻Ⅱ优明恢86,另外水稻生长中后期两个转Bt/CpTI水稻科丰8号和Ⅱ优科丰8号土壤脲酶活性也差异显著。由此可见不同水稻基因型对土壤脲酶活性的影响较大。在不同的生育时期,种植不同基因型水稻对根际土壤酸性磷酸酶和碱性磷酸酶酶活性无显著性影响。   转Bt/CpTI基因水稻对土壤细菌种群多样性的影响。用分子生物学(PCR-DGGE)方法研究转基因水稻对土壤细菌群落结构和多样性的影响。利用特异引物扩增土壤细菌16SrDNA基因片段并进行DGGE电泳,通过对DGGE图谱的聚类分析和Shannon多样性指数计算,比较了不同基因型水稻土壤细菌群落组成。结果表明,在水稻生长的整个时期转Bt/CpTI基因水稻土壤细菌群落结构和多样性指数与非转基因野生型水稻间均没有显著差异。   转Bt/CpTI基因水稻对土壤真菌种群多样性的影响。采用真菌特异性引物扩增真菌SSUrDNA片段并结合PCR-DGGE方法,计算各个样品的Shannon多样性指数,以此分析转Bt/CpTI基因对水田真菌种群多样性的影响。结果表明,在水稻生长的整个时期转Bt/CpTI基因水稻土壤真菌群落结构和多样性指数与常规稻间均没有显著差异。   转Bt/CpTI基因水稻对土壤固氮细菌种群多样性的影响。利用土壤固氮细菌nifH基因特异引物的PCR扩增并进行DGGE电泳,通过对DGGE图谱的聚类分析和Shannon多样性指数计算,研究了转Bt/CpTI基因水稻对水稻土壤固氮细菌多样性的影响。结果表明转Bt/CpTI基因水稻对土壤固氮细菌群落结构和多样性没有显著性影响。
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