饲用型辣木优树组织培养与枝叶青贮调制

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传统印度辣木(Moringa oleifera Lam.)为辣木科(Moringaceae)辣木属(Moringa)多年生落叶木本植物。起源于印度北部,广泛分布于热带和亚热带国家,我国主要集中引种栽培在海南、两广、云南、四川和福建等地。辣木生长速度快,其叶富含蛋白质、各类维生素、矿物质(钙、钾、铁)、氨基酸等成分。因此,利用辣木枝叶作饲料可有效缓解我国蛋白质饲料资源紧缺的现状,提高畜禽动物产品的产量和品质。然而目前辣木发展中存在的一个突出问题是缺乏良种,也缺乏有关辣木的青贮调制技术。本研究以不同辣木优树的嫩枝茎段为外植体,采用器官直接发生方式进行组织培养研究,比较不同基因型的再生能力;同时,从辣木青贮饲料中分离筛选乳酸菌作为添加剂,并控制原料含水量和环境温度,分析青贮发酵品质和微生物多样性,主要结果如下:(1)辣木嫩枝茎段消毒最佳时间为用75%酒精浸泡30 s,然后用0.1%升汞处理7 min。在该条件下,污染率最低,且茎段存活率最高,达53.33%。8个优树腋芽的启动率存在较大差异,其中M-2、M-4和M-7启动率最高,M-1和M-3启动率最低。不同优树腋芽均能诱导出不定芽,但不定芽诱导率和增殖系数存在显著差异,其中,M-8号诱导率和增殖系数最高,分别为96.00%和3.12。不同优树不定芽生根率和平均根长也存在显著差异,以M-7号的平均根长最长,达3.36 cm,平均根数最多,达1.87。(2)不同增殖培养基对M-8号优树不定芽诱导率和增殖系数有显著影响。诱导不定芽的的最佳培养基为:MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.01 mg/L,最佳生根培养基为:MS+NAA 0.01 mg/L。(3)从辣木青贮饲料中共分离纯化鉴定得到96株乳酸菌。其中植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)最多,为59株,香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminis)其次,为31株,乳球菌(Lactococcus lactis)和魏斯氏菌(Weissella thailandensis)最少,均仅为3株。大部分乳酸菌在MRS肉汤培养基中培养24 h后,培养基的p H值为3.53~3.79,少数几株乳酸菌p H值>4.0。(4)含水量、两种乳酸菌添加剂、含水量和乳酸菌添加剂的交互作用对辣木叶青贮发酵品质如干物质损失、p H值、乳酸菌数量、乳酸/乙酸和乳酸杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、片球菌属(Pediococcus)等均有显著影响(P<0.05)。两种乳酸菌添加在辣木叶青贮发酵过程中加速了乳酸的积累和p H值的下降,抑制了大肠杆菌和酵母菌的生长,减缓了干物质的损失,在一定程度上改善辣木叶青贮发酵品质,同时,在青贮过程中,两种乳酸菌添加剂均能抑制肠杆菌属(Enterobacter)并促进乳酸杆菌属的增加。乳球菌属、肠球菌属和明珠串菌属的相对丰富度在发酵前14天增加,随后减少。(5)温度和乳酸菌添加剂对辣木叶青贮发酵品质和微生物群落均有显著影响。4种乳酸菌添加剂均降低了辣木叶的p H值和氨态氮含量。30℃条件下,干物质损失、乳酸、乙酸、氨态氮含量和乳酸菌数量极显著增加(P<0.01),同时,细菌丰富度和多样性也相对较高。此外,温度对青贮辣木叶中其他细菌如假单胞菌属(Pseudomonas)、不动杆菌属(Acinetobacter)和微小杆菌属(Exiguobacterium)等的相对丰富度也有显著影响。
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