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Ⅰ型鸭病毒性鸭肝炎(duck hepatitis virus,DVH)是雏鸭的一种高度致死性的、传播迅速的病毒性疾病。感染Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV—Ⅰ)的雏鸭发病率和死亡率很高,免疫接种是目前预防和控制鸭肝炎的主要手段。但是,DHV仍然时有发生,给养鸭业造成了巨大的经济损失。目前临床上急需简便快捷的检测鸭肝炎病毒抗体水平的检测方法,作为DHV抗体监测参考标准,指导养鸭生产。本研究旨在优化本实验室已建立的DHV—Ⅰ抗体乳胶凝集试验方法,观测蛋鸭和雏鸭的DHV—Ⅰ抗体变化曲线。具体研究成果如下:1.采用差速超高速离心的方法纯化病毒,用磷钨酸负染电镜观察、鉴定,可见清晰完整的DHV—Ⅰ病毒粒子,有个别病毒的的核酸部分尚未降解,病毒粒子直径约为20-40nm,核衣壳为对称的二十面体。2.将经过纯化病毒灭活后用于致敏聚苯乙烯乳胶,优化检测DHV-Ⅰ抗体的LAT方法。血清抗体的检测标准为:用倍比稀释的试验鸭血清与致敏后的乳胶进行反应,能够在3-5分钟内产生肉眼可见颗粒。3.用LAT方法观察经过四次鸭肝炎弱毒疫苗免疫的蛋鸭血清中的DHV—Ⅰ抗体,得到了高免蛋鸭随时间变化的DHV—Ⅰ抗体变化曲线。研究发现第二次免疫后10天到第四次免疫后10天抗体水平较高,抗体效价维持在8以上,第四次免疫后20天抗体水平急剧下降至2左右。因此,如要获得高免卵黄抗体,需对蛋鸭进行多次免疫并适时检测其抗体水平。4.用LAT方法监测无母源抗体雏鸭的DHV—Ⅰ抗体变化,获得了无母源抗体雏鸭免疫后随时间变化的DHV—Ⅰ抗体变化规律,研究发现,无母源抗体的雏鸭经DHV—Ⅰ弱毒疫苗免疫后一个星期抗体水平达到最高,可达到7.1,之后略有下降,直到免疫后20天抗体效价维持在5左右,而注射卵黄抗体的雏鸭在注射抗体后的第3天抗体水平达到最高,可达7.7,免疫后7天抗体水平逐渐下降至5左右。因此,对人工主动免疫和被动免疫进行比较发现DHV—Ⅰ弱毒疫苗免疫更适用于雏鸭早期免疫,而高免DHV—Ⅰ卵黄抗体则适用于DVH的治疗和紧急预防。5.用LAT方法监测有母源抗体雏鸭的DHV—Ⅰ抗体变化,获得了有母源抗体雏鸭免疫后随时间变化的DHV—Ⅰ抗体变化规律,研究发现,有母源抗体的雏鸭无论是1日龄免疫还是免疫后人工感染DHV—Ⅰ强毒,其抗体水平一直下降,免疫后一个月下降至4.5左右。DHV—Ⅰ弱毒疫苗免疫不干扰母源抗体的作用,还有助于提高雏鸭的DHV—Ⅰ抗体水平。另外,研究中还初步获得了有母源抗体雏鸭的保护力为乳胶凝集价应为8,即抗体稀释度为1:2~8。