目的:探讨大麻素CB2受体激动剂AM1241对大鼠肝星状细胞系HSC-T6的影响及其机制。方法:1、噻唑蓝法分别检测(0、20、50、80umol/L)AM1241和(0、10、20、30、40umol/L)AM630干预24h下HSC-T6的存活率,根据实验所测得的细胞存活率选择最佳的用药浓度。2、将HSC-T6分成对照组、氧化应激组、AM1241(20、80 umol/L)干预组共四组。对照组用低糖(Dulbecco’s modification of Eagle’s medium Dulbecco,DMEM)完全培养液正常培养2h,氧化应激组用含葡萄糖氧化酶(100m U/L)低糖DMEM完全培养液培养2 h,AM1241干预组分别加入20、80umol/L的AM1241干预3 h后,再加入葡萄糖氧化酶(100 mU/L)干预2 h。细胞免疫化学染色法观察各组HSC-T6胞浆中α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况;收集各组HSC-T6的培养液上清,离心之后,ELISA检测上清液中的Ι型胶原(type colcollagenΙ,ColⅠ)的含量;检测HSC-T6裂解液中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量;Western blot检测HSC-T6中核转录相关因子(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)总蛋白与核蛋白含量。3、将HSC-T6分成对照组、氧化应激组、AM1241干预组、AM1241+AM630拮抗组共四组。对照组用低糖DMEM完全培养液正常培养12h,氧化应激组用含100mU/L的葡萄糖氧化酶的低糖DMEM完全培养液培养12h;AM1241干预组用含50umol/L AM1241的低糖DMEM完全培养液培养12h,AM1241+AM630拮抗组用大麻素CB2受体拮抗剂20umol/L AM630干预2h后,再用含50umol/L AM1241的低糖DMEM完全培养液培养12h;ELISA法检测各组HSC-T6培养液上清ColⅠ和Ⅲ型胶原(type ColcollagenⅢ,ColⅢ)的含量;检测各组HSC-T6裂解液中谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量;Western blot法分别检测HSC-T6中大麻素型Ⅱ受体(Cannabinoid Receptor 2,CB2)、Nrf2、血红素加氧酶1(hemeoxygenase-1,HO-1)的蛋白表达量。结果:1、(20、50、80umol/L)AM1241干预组HSC-T6的存活率依次降低,与0umol/L AM1241干预组相比较,有统计学意义(p<0.05),AM630各浓度组对HSC-T6的存活率无明显作用(p>0.05)。2、对照组HSC-T6胞质中无明显α-SMA表达,氧化应激组α-SMA明显表达,与氧化应激组比较,AM1241(20、80umol/L)干预组HSC-T6胞质α-SMA表达有所下降(p<0.05);与对照组比较,氧化应激组HSC-T6细胞培养上清中Col I含量升高(p<0.05),与氧化应激组比较,AM1241(20、80 umol/L)干预组HSC-T6细胞培养上清中Col I含量明显下降(p<0.05)。氧化应激组HSC-T6较对照组HSC-T6中MDA含量上升,SOD活性明显下降(p<0.05),与氧化应激组比较,AM1241(20、80 umol/L)干预组HSC-T6细胞MDA含量下降,SOD活性明显上升(p<0.05);对照组、氧化应激组、AM1241(20、80umol/L)干预组HSC-T6细胞中Nrf2总蛋白表达量无明显差异(p>0.05);AM1241(20、80 umol/L)干预组Nrf2核蛋白表达量比氧化应激组明显增多(p<0.05)。3、与对照组相比,氧化应激组HSC-T6的细胞外基质ColⅠ、ColⅢ的表达量明显升高(p<0.05),AM1241干预组HSC-T6的细胞外基质ColⅠ、ColⅢ的表达较氧化应激组明显减低(p<0.05),而AM1241+AM630干预组HSC-T6 ColⅠ、ColⅢ的含量比AM1241干预组明显增高(p<0.05),与氧化应激组相比无明显差异;与对照组相比,氧化应激组HSC-T6中的GSH含量有所升高(p<0.05),AM1241干预组HSC-T6中的GSH含量较氧化应激组相比有所升高,而AM1241+AM630拮抗组HSC-T6中GSH的含量较AM1241干预组明显下降(p<0.05),与氧化应激组无明显差异;对照组、氧化应激组、AM1241干预组、AM630+AM1241拮抗组HSC-T6中CB2的蛋白有所表达,与比对照组相比,AM1241干预组CB2的表达有所增高(p<0.05);氧化应激组、AM1241干预组HSC-T6中Nrf2、HO-1的蛋白表达比对照组均明显增高,AM1241干预组增高更为明显,而AM630+AM1241拮抗组的Nrf2、HO-1的蛋白表达明显低于AM1241干预组(p<0.05),与氧化应激组无明显差异。结论:大麻素CB2受体激动剂AM1241可抑制HSC-T6的增殖与活化,其机制可能与AM1241经大麻素CB2受体通道,激活HSC-T6细胞内Nrf2,使Nrf2发生核内转移,导致Nrf2和HO-1的蛋白表达量上调,增加HSC-T6的抗氧化作用有关。