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目的:将构建的UL27 sh RNA质粒表达载体转入BALB/c雌性小鼠生殖器疱疹(GH)动物模型体内,评价UL27sh RNA质粒对GH小鼠模型的疗效。方法:阴道栓塞注射法制备BALB/c雌性小鼠GH动物模型。选取GH模型小鼠30只,分为三组,每组10只。UL27sh RNA作为治疗组,sh RNA空载体作阴性对照组,采用脂质体lipofectamine 2000作为转染试剂,转染500 pmol UL27sh RNA或sh RNA空载体至小鼠阴道上皮。脂质体悬液作空白对照组,间隔4小时给药,每天3次,连续给药7天,第3、5、7天记录小鼠外阴病变程度的评分,给完药后解剖小鼠进行疗效观察。解剖前棉签蘸取阴道分泌物,终点滴定法测定病毒滴度,HE染色技术观察小鼠阴道组织形态学上的病理变化,实时荧光定量PCR检测UL27基因m RNA的表达水平,Western blot分析UL27基因表达的g B蛋白水平。结果:(1)阴道栓塞注射法转染0.1ml TCID5010-5的HSV-2病毒株至小鼠阴道上皮后,外阴出现红肿且分泌物增多,病理学检测有表皮内水疱,细胞内水肿。(2)给药第3天开始,UL27sh RNA治疗组外阴病变程度评分明显低于sh RNA空载体组和空白对照组(P<0.05),而sh RNA空载体组评分与空白对照组相比无明显降低(P>0.05)。(3)UL27sh RNA治疗组病毒滴度与sh RNA空载体组和空白对照组相比有显著下降(P<0.05),而sh RNA空载体组和空白对照组相比无明显差异(P>0.05)。(4)病理学观察显示经UL27sh RNA治疗的GH小鼠与sh RNA空载体组和空白对照组相比能有效抑制炎性细胞的侵润,sh RNA空载体组和空白对照组相比抑制炎性细胞侵润效果不明显。(5)实时荧光定量PCR检测结果显示UL27sh RNA治疗组的m RNA表达抑制率为37.28%,比sh RNA空载体组的6.26%和空白对照组的抑制效果明显(P<0.05),sh RNA组与空白对照组相比抑制效果不明显(P>0.05)。(6)Western blot检测结果显示UL27sh RNA治疗组与sh RNA空载体组和空白对照相比抑制g B蛋白表达明显(P<0.05),而sh RNA空载体组与空白对照组相比抑制效果不明显(P>0.05)。结论:构建的UL27sh RNA质粒表达载体能够在一定程度上抑制小鼠阴道上皮组织中炎症细胞的浸润,抑制了UL27基因在感染HSV-2的BALB/c雌性小鼠体内基因表达,对GH小鼠有一定的疗效。