1栉孔扇贝(Chlamys farreri)♀×海湾扇贝(Argopecten irradians)♂异源三倍体诱导及细胞遗传学研究受精过程荧光显微观察表明,选择充分促熟的亲贝,20℃水温下,远缘杂交可以顺利进行。精子入卵后可以激活卵子完成减数分裂,进而精卵原核融合,卵裂,早期胚胎能够正常发育。观察初步证实异源精子参与了后代遗传物质的组成,具备异源多倍体诱导操作的可行性。以50%的受精卵排出第1极体为诱导时机,以60 mg/L 6-DMAP为诱导剂量,处理15min,平均三倍体诱导率可达88.56%,孵化率可达53.52%。孵化后幼虫生长缓慢,死亡严重。受精后14天壳长仅为148μm左右,远低于自交对照组(173μm)。14天幼虫存活率仅0.00067%。GISH分析表明,诱导获得的三倍体胚胎其染色体组由2套母本染色体组和1套父本染色体组构成,确为异源三倍体。约2%的分裂相出现母本偏向性染色体转变。类型包括染色体片段,及整条染色体的遗传转变。表明异源基因组并不稳定,存在复杂的核-核、核-质相互作用,可能与幼虫不能成活有关。2虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)三倍体诱导与培育尝试低渗法诱导虾夷扇贝三倍体,获得最优诱导条件:12℃水温,以50%的受精卵排出第1极体为处理时机,20‰的盐度条件处理受精卵20min,D形幼虫平均三倍体得率可达91.24%,平均孵化率达52.94%。倍性变化趋势:大规模诱导群体在D形幼虫至2龄成贝期间,以D形幼虫期三倍体率最高,达50.06%。随后,三倍体率急剧下降,到4月龄降至12.07%。从4月龄到8月龄三倍体率下降趋于缓慢,至8月龄降至7.27%。8月龄至24月龄成贝期间三倍体率基本稳定。人工诱导三倍体在4月龄至24月龄期间均未表现出生长优势。24月龄成贝,三倍体平均壳高、壳长、壳宽、总重分别比二倍体对照低8.59%、10.33%、8.79%和24.78%。3虾夷扇贝三倍体(P.yessoensis)育性与四倍体培育三倍体性成熟期比对照晚1月左右。共检测三倍体个体60只。性腺存在不同程度的发育,总体水平低下。雄性先于雌性发育。雄性性腺多为乳白色,个别微泛黄,雌性多为橘红色,个别颜色较淡。性比基本正常,1龄期雌雄比约1:1.18,2龄期雌雄比约1:1.50。未发现雌雄同体个体。雄性三倍体共催产29只,无一排精。电镜检测3只雄性性腺,发现存在大量精子细胞。精核开始浓缩,呈现不规则多边形。部分精子细胞线粒体嵴稀少,甚至呈空泡状。内质网稀少,未发现顶体形成,也未发现成熟精子。雌性三倍体共催产23只,4只排卵。卵子平均直径86.65±2.53μm,比二倍体大10.79%,体积大35.99%。相对育性(产卵量)1龄为3%,2龄为4%。荧光显微观察表明,三倍体的卵子具有受精能力,与二倍体的精子受精后大多数能够类似正常的分裂和发育。约30%的卵子减数分裂异常,染色体行为不同步。3n♀x2n♂,子代主要为非整倍体,约70%幼虫倍性介于2n和3n之间,30%介于3n和5n之间。D形幼虫孵化率仅0.23%,至7日龄未发现存活幼虫。以20‰的盐度条件处理3n♀×2n♂受精卵20min抑制第1极体释放,胚胎最高四倍体率达75.12%。幼虫发育异常迟缓,约受精后65h到达担轮期,120h到达D形期,孵化率平均仅0.09%。7日龄存活率仅0.07%。4三倍体虾夷扇贝(P.yessoensis)基因组甲基化水平的MSAP分析虾夷扇贝三倍体13只二倍体20只,来源于同一诱导群体。9对引物MSAP扩增共得到7206条条带,其中甲基化条带1988条(27.6%),包括全甲基化1095条(15.2%),半甲基化893条(12.4%)。主要结论为:(1)虾夷扇贝基因组甲基化水平较高。(2)个体间基因组甲基化水平差异较大。(3)三倍化导致虾夷扇贝基因组甲基化降低。(4)甲基化水平与性别有关。平均总甲基化率:雌性高于雄性。(5)平均总甲基化率:二倍体雌性>二倍体雄性>三倍体雌性>三倍体雄性。(6)三倍化不利于虾夷扇贝雌性性状表达和性腺发育。