论文部分内容阅读
目的:通过构建心力衰竭(HF)大鼠模型,探讨黄芪温心组方对HF大鼠心室重塑的作用及其分子机制。材料与方法:将40只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组(空白组,n=10)和心力衰竭组(n=30)。心力衰竭组采用腹腔注射阿霉素(Adr)诱导构建HF大鼠模型,空白组注射等体积的生理盐水,6w后应用多普勒超声诊断仪检测HF大鼠模型是否构建成功。将造模成功的27只大鼠随机分为模型对照组(模型组)、卡托普利对照组(卡托普利组)以及黄芪温心组方组(中药组),每组9只。卡托普利组予2.25mg/kg/d的卡托普利灌胃;中药组予9.2g/kg/d的黄芪温心组方灌胃,空白组、模型组给予等体积的生理盐水。4w后应用多普勒超声诊断仪检测大鼠心脏结构及功能;ELISA法检测血浆BNP水平评估大鼠心力衰竭程度;HE染色观察大鼠心脏组织形态;Masson染色观察心肌细胞纤维化的程度及测定心肌组织胶原容积分数(CVF);RT-q PCR检测心室重塑相关因子MMP-9、TIMP-1m RNA的表达;Western blot检测RhoA/ROCK信号通路蛋白表达。结果:1.心脏结构和功能:药物治疗前,心力衰竭组LVIDd与空白组比均明显升高(P<0.05),LVEF明显减低(p<0.05),可以证实注射阿霉素后大鼠HF模型构建成功。药物治疗后,中药组及卡托普利组与模型组相比LVIDd均显著降低(p<0.05),LVEF均显著提高(p<0.05);中药组与卡托普利组大鼠LVIDd、LVEF无统计学差异(p>0.05)。2.血浆BNP水平:药物干预治疗前,心力衰竭组大鼠血浆BNP与空白组比均显著提高(p<0.05)。药物干预治疗后,卡托普利组及中药组大鼠血浆BNP与模型组相比均显著降低(p<0.05);中药组大鼠血浆BNP与卡托普利组无统计学差异(p>0.05)。3.心肌组织形态:空白组心肌排列整齐,胞核完整,心肌细胞无肥大及萎缩。间质无水肿,无结缔组织增生,无炎性浸润。模型组心肌细胞排列混乱,心肌细胞纤维粗细不等,胞核大小不一,部分胞核缺失,可见纤维瘢痕灶。中药组和卡托普利组心肌细胞排列相对整齐,心肌间质水肿轻,间质内有少量炎细胞浸润,心肌纤维无明显改变,染色相对均匀。4.心肌纤维化情况:Masson染色可见模型组大鼠心肌纤维化较空白组明显加重,CVF显著增加(p<0.05);卡托普利组及中药组大鼠心肌纤维化与模型组相比明显减轻,CVF显著降低(p<0.05);中药组与卡托普利组大鼠纤维化程度无统计学差异,CVF无统计学差异(p>0.05)。5.心室重塑情况:模型组大鼠心肌MMP-9 m RNA表达与空白组相比明显提高(p<0.05),TIMP-1 m RNA表达明显下降(p<0.05),心室重塑程度加重;卡托普利组及中药组大鼠心肌MMP-9 m RNA表达与模型组相比明显下降(p<0.05),TIMP-1 m RNA表达明显提高(p<0.05),心室重塑程度减轻;中药组及卡托普利组大鼠心肌MMP-9、TIMP-1 m RNA表达无统计学差异(p>0.05)。6.RhoA、ROCK蛋白表达:模型组大鼠心肌组织中RhoA、ROCK蛋白表达水与空白组相比明显增加(p<0.05);卡托普利组及中药组大鼠RhoA、ROCK蛋白表达与模型组相比显著降低(p<0.05);中药组及卡托普利组大鼠RhoA、ROCK蛋白表达无统计学差异(p>0.05)。结论:1.黄芪温心组方能够改善HF大鼠心脏功能,减轻心肌损伤,抑制心肌纤维化,延缓心室重塑,对心脏发挥保护作用,其作用与卡托普利相当。2.黄芪温心组方能够通过下调MMP-9,上调TIMP-1,抑制RhoA/ROCK信号通路的过度激活从而改善HF大鼠心室重塑,其作用与卡托普利相当。