研究目的:隐丹参酮（cryptotanshinone,CPT）对于结直肠癌细胞（colorectal cancer cells,CRC）的生长抑制以及作用机制的研究。实验方法:临床样本:将取得的临床样本进行包埋切片,用免疫组化法检测在患者的肿瘤组织及对应的癌旁组织中凋亡相关蛋白（cleaved caspase-3）和自噬相关蛋白（LC3B）的表达。体外细胞实验:细胞实验将体外培养的直肠癌细胞HCT116细胞和SW620细胞用不同方式处理,分为对照组、给药组（1μM CPT组和10μM CPT组）、单独抑制剂组（Spautin-1组,4-PBA组）、联合处理组（Spautin-1+CPT组,4-PBA+CPT组）和阳性药物组（顺铂组）。MTT法、乳酸脱氢酶（LDH）释放法和平板克隆实验检测药物对于细胞生长和增殖的影响;采用FITC Annexin V-PI染色和JC-1染色检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法（Western blot）法检测凋亡（caspase-3和cleaved caspase-3）、自噬（LC3B）和内质网应激（BIP）等相关蛋白的表达;吖啶橙染色检测细胞内酸性细胞器自噬溶酶体。动物实验:选用成熟的AB型斑马鱼建立异种移植肿瘤模型,将其分组为对照组,给药组（50 n M组和100 n M组）,以检测CPT在体内对肿瘤生长的抑制作用。实验结果:1.在临床样本中,相对于癌旁组织,肿瘤组织中cleaved caspase-3和LC3B的表达水平显著降低。2.在体外细胞实验中,CPT可以显著地抑制HCT116和SW620细胞增殖和细胞集落的形成,而对SW480细胞无抑制作用。在体内实验中,CPT可以显著地抑制斑马鱼体内肿瘤的生长。3.JC-1染色检测到CPT处理后的HCT116和SW620细胞内线粒体的膜电位降低;蛋白免疫印迹法（Western Blot）结果表明,CPT可以上调cleaved caspase-3表达量并浓度依赖性地诱导HCT116和SW620细胞凋亡。4.CPT处理的HCT116和SW620细胞中自噬相关蛋白（LC3B）的表达量呈现时间依赖性地增高。然而,MTT、LDH和平板克隆实验结果表明,自噬抑制剂Spautin-1可以有效地逆转CPT导致的HCT116细胞死亡,而对SW620细胞没有影响。同时Spautin-1的加入可以下调CPT引发的凋亡相关蛋白（cleaved caspase-3）的表达,减少细胞的凋亡。5.CPT处理HCT116细胞后内质网应激相关蛋白（BIP和p-PERK）表达量显著增加。内质网应激抑制剂4-PBA可以逆转CPT诱导的HCT116细胞死亡,并且促进细胞集落形成。此外,4-PBA可有效地抑制CPT处理的HCT116细胞中LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化和自噬溶酶体的形成,并且降低CPT诱导的细胞凋亡率。结论:1.CPT在体内和体外抑制结直肠癌细胞HCT116和SW620的增殖。2.CPT通过自噬途径促进HCT116细胞凋亡。3.CPT诱导的内质网应激在自噬的上游调控HCT116细胞的凋亡。