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本研究根据O-(2-异丙氧基羰基苯基)硫代磷酰胺类有机磷农药的公共结构，以O-甲基硫代磷酰二氯、水杨酸异丙酯和γ-氨基丁酸为原料，合成了相应的通用半抗原。通过活泼酯法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联，合成了相应的免疫原和包被原。用免疫原免疫小鼠，通过常规方法融合、筛选，最终获得了一株杂交瘤细胞6B5/E3。此细胞株分泌的抗体亚型为IgG1，轻链为κ型，亲和常数为4.64×107L/mol。此单克隆抗体对水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷有明显的识别作用，对其它农药则不识别。以杂交瘤细胞株6B5/E3所分泌的单克隆抗体为基础，通过对检测体系中封闭物、离子强度、pH值等影响因子进行研究，建立了O-(2-异丙氧基羰基苯基)硫代磷酰胺类农药多残留的ELISA检测体系。在此优化的检测体系下，分别建立了三种农药（水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷）的ELISA标准曲线。以Logit(B/Bo)为纵坐标，农药浓度的对数值为横坐标，进行转化，分别得到了三个线性方程。水胺硫磷的线性方程为y=-2.1313x+2.9175，相关系数R2达0.9908，I50为23.39ng/ml，最低检测限为12.19ng/ml，在土壤、纯水和大米中的平均添加回收率分别为112.86％、103.54％和104.81％。甲基异柳磷的线性方程为y=-1.9333x+3.5754，相关系数R2达0.9938，I50为70.79ng/ml，最低检测限为34.51ng/ml，在土壤、纯水和大米中的平均添加回收率分别为105.63％、107.84％和101.85％。乙基异柳磷的线性方程为y=-1.2001x+2.1553，相关系数R2达0.9796，I50为62.52ng/ml，最低检测限为19.68ng/ml，在土壤、纯水和大米中的平均添加回收率分别为100.54％、91.63％和102.27％。 本研究获得了O-(2-异丙氧基羰基苯基)硫代磷酰胺类农药的单克隆抗体，为检测这类农药提供了理论依据，也为这类农药的快速检测提供了很好的方法，为农药检测试剂盒的开发提供了条件。