辣椒溶杆菌(Lysobacter capsici)X2-3是本实验室从小麦根际土壤中分离到的一株对小麦纹枯病菌(R.cerealis)具有较好拮抗作用的菌株,该菌株对立枯丝核菌(R.solani)、小麦根腐病菌(B.sorokiniana)等多种植物病原真菌和群结腐霉(P.myriotylum)等卵菌有明显的抑菌活性。为了解该菌株产生的抗菌物质及其作用特点,本研究首先对该菌株的培养条件进行了优化,初步分离了该菌株产生的抗菌物质;在此基础上,分析了抗菌物质的理化性质,并对其作用机制进行了初步研究。取得的主要研究结果如下:1、菌株X2-3培养条件的优化以R.solani为指示菌,用菌丝生长速率法测定了不同培养基条件下,L.capsici X2-3产生的抗菌物质的抑菌能力。结果表明,X2-3经PDB培养液培养3天,其无孢子滤液对R.solani抑菌活性最强,菌落直径明显小于对照。以PDB为基础培养基,从接菌量、pH、装液量、培养时间、培养温度及转速等几个方面,对菌株X2-3的培养条件进行了优化,结果表明,在pH 5.0、接种量2%、装液量100ml/250ml、转速为180r/min时,28℃培养120h,X2-3无孢子滤液对R.cerealis抑菌活性最强,确定该条件为最优培养条件。2、菌株X2-3抗菌物质的分离纯化为分离纯化抗菌物质,首先,对L.capsici X2-3无菌滤液用硫酸铵沉淀,抑菌活性测定发现,沉淀物对指示菌R.solani有明显的抑菌活性,上清液中未发现有活性物质。以三氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇3种溶剂为萃取剂分析了不同萃取剂对抗菌物质的萃取效果,发现硫酸铵沉淀物经甲醇萃取后,萃取物对指示菌R.solani的抑菌活性最强,抑菌半径约5mm,乙酸乙酯和三氯甲烷萃取液抑菌半径分别为2mm和1mm;对甲醇萃取物用紫外分光光度计在200-800nm波长范围进行光谱扫描,发现粗提物在244nm处有最大吸收峰。采用硅胶柱层析方法分析了石油醚、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇等5种洗脱剂对粗提物的洗脱效果,发现,以甲醇为洗脱剂时,洗脱液紫外吸光度最高,为2.5AU,洗脱效果最好,其它洗脱液效果较差。确定甲醇为柱层析的最佳洗脱液。3、菌株X2-3抗菌粗提物的理化性质分析从温度、紫外线和蛋白酶K处理等三个方面分析了抗菌粗提物的稳定性,结果发现,X2-3产生的抗真菌物质在40℃-80℃水浴处理30min后,其抗菌活性与对照几乎没有差异;90-100℃水浴处理后,抗菌活性虽显著降低,但仍有抑菌活性,表明该物质对温度有一定忍耐力。粗提物经蛋白酶K处理2 h后,该物质的抗菌活性与对照几乎没有差异,说明该物质对蛋白酶K不敏感。粗提物经紫外照射1h、2h、4h后,抗菌物质的抑菌活性与对照无明显差异,说明该抗菌物质具有较好的紫外稳定性。4、抗菌粗提物的抗菌特性分析生物测定发现,经甲醇萃取的粗提物对B.sorokiniana、Colletotrichum truncatum、F.graminearum和P.myriotylum等真菌和卵菌都有明显的抑菌活性;以玉兰叶斑病菌和烟草青枯病菌为指示菌,分析了粗提物的抗细菌活性,发现,该物质对革兰氏阳性细菌玉兰叶斑病菌有明显的抑菌活性,其最小抑菌浓度为1.72μg/ml,但该物质对烟草青枯病菌没有作用。5、粗提物对病原真菌的作用机制初步分析以R.solani和B.sorokiniana为指示菌,初步分析了抗菌物质的作用机制,发现经粗提物处理后,R.solani的菌丝体表现局部膨大、异常分支等现象;处理后8h,小麦根腐病菌分生孢子萌发率约为1%,而对照中孢子萌发率约为85%,表明该物质能显著抑制孢子萌发。