在减毒鳗弧菌中采用多种方法表达迟钝爱德华氏菌抗原GAPDH以及多价疫苗的构建和评价

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随着基因工程技术的飞速发展,多价减毒活疫苗技术已被广泛应用到了水产养殖业中。本课题以实验室前期成功开发的鳗弧菌减毒活疫苗MVAV6203为载体,以迟钝爱德华氏菌保护性抗原蛋白GAPDH为靶标蛋白,通过比较高拷贝质粒与中低拷贝质粒介导抗原表达方式,胞内表达抗原与表面展示表达抗原方式,体内诱导启动子与组成型启动子表达抗原方式,在斑马鱼系统中进行了不同抗原表达策略下的免疫保护效果评价。研究结果表明:由低拷贝质粒介导,组成型启动子启动表达,冰核蛋白介导抗原表面展示的情况下,鳗弧菌多价疫苗候选株MVAV6203 (patLNG40)对鳗弧菌和迟钝爱德华氏菌表现出了最佳的免疫保护效果。本研究进一步对获得的鳗弧菌多价疫苗候选株在大菱鲆中进行了免疫/攻毒实验评价,实验结果表明:该疫苗株注射免疫大菱鲆30天后,能针对鳗弧菌和迟钝爱德华氏菌的注射攻毒产生超过70%的免疫保护力,具有较好的产品开发潜力。
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