IL-2对高糖条件下MG63细胞增殖及凋亡的影响

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目的与背景:随着人们对口腔健康日益关注,临床上遇到的患者的类型也逐渐增多。在医师们进行口腔修复工作时,遇到最多,也是最难解决的问题之一,便是患者长期缺牙后牙槽骨吸收严重,导致牙槽骨高度不足与宽度欠佳,这无疑给临床修复工作带来了一大难题。而其中又有这样一类患者,因为有多年糖尿病病史,缺牙后牙槽骨吸收的严重程度往往比健康人更大,这就使得这类患者在进行义齿修复后,临床效果并不十分理想,生活质量也难以得到良好的改善。糖尿病患者最常见的并发症之一即为糖尿病性骨质疏松症,牙槽骨作为全身骨骼的一部分,自然也受到影响。糖尿病患者的血糖长期处在一个较高的水平,而高血糖便是糖尿病性骨质疏松症的始动因子。所谓骨质疏松症,即单位体积骨量减少伴有骨强度减低,主要与骨吸收和骨形成之间的动态平衡遭到破坏有关。骨形成与骨吸收分别由成骨细胞与破骨细胞完成,因此成骨细胞的数量多少与活性水平直接影响着骨量。成骨细胞的增殖与活性受多种因素的影响,包括激素,局部生长因子以及细胞因子等。本实验通过体外培养人成骨肉瘤细胞MG63,用高糖培养基作用于细胞,在某种程度上模拟糖尿病患者体内的高血糖环境,然后用不同浓度的白介素-2作为药物干预高糖培养基所培养的成骨细胞,对比观察不同浓度白介素-2对高糖条件培养下的成骨样细胞在增殖,细胞周期及凋亡方面的影响,探讨白介素-2作为干预药物所起到的作用及其作用机制,为今后相关临床实验及基础研究提供一定的理论参考。方法:选用MG63细胞株(吉林大学口腔医学院病理实验室保存),将冻存的细胞复苏,接种于25ml细胞培养瓶中,置于细胞培养箱中培养至细胞长满瓶底,传代培养后将细胞分别接种于96孔板和6孔板进行实验。实验分为五组:①空白对照组:正常培养基培养;②高糖组:高糖培养基培养;③白介素-2干预组1:高糖培养基+IL-2(100U/ml)培养;④白介素-2干预组2高糖培养基+IL-2(500U/ml)培养;⑤白介素-2干预组3:高糖培养基+IL-2(1000U/ml)培养。96孔板每组5个样本,6孔板每组3个样本,实验重复3次取平均值。检测对照组与实验组培养48小时后各组MTT值,流式细胞仪测定细胞增殖及凋亡情况,进行统计学分析。结果:①MTT法测得高糖组细胞吸光度值低于空白对照组;IL-2干预各组吸光度值高于高糖组,但仍低于空白对照组。②流式细胞仪进行细胞周期分析,得出高糖培养抑制成骨细胞增殖,而经白介素-2干预后,成骨细胞增殖的抑制作用得到缓解,且随着白介素-2浓度增加,这种缓解作用也随之增大。③流式细胞仪进行细胞凋亡率分析,得出高糖培养下的成骨细胞凋亡率明显高于空白对照组,而白介素-2干预组的成骨细胞凋亡率与高糖组相比明显降低,且随着白介素-2浓度的增加,凋亡比率逐渐减小。结论:1.高糖培养能够促使成骨细胞凋亡;2.白介素-2对高糖培养导致的细胞增殖减少起抑制作用;3.随着白介素-2浓度增加,这种抑制作用有增长趋势。
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