【摘 要】
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应激性免疫抑制和鸡传染性法氏囊病（IBD）均可抑制机体免疫功能,然而应激性免疫抑制影响鸡传染性法氏囊病毒（IBDV）疫苗免疫应答的体内效应与作用机制未见报道。本研究利用地塞米松模拟雏鸡应激性免疫抑制,研究免疫抑制雏鸡在IBDV疫苗免疫应答过程中候选的13种IBDV相关miRNA在不同时间点血清中的表达特性与变化规律,并进一步探索miR-20a-5p及其预测靶基因BCL11B在不同处理组三个时间点（
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应激性免疫抑制和鸡传染性法氏囊病（IBD）均可抑制机体免疫功能,然而应激性免疫抑制影响鸡传染性法氏囊病毒（IBDV）疫苗免疫应答的体内效应与作用机制未见报道。本研究利用地塞米松模拟雏鸡应激性免疫抑制,研究免疫抑制雏鸡在IBDV疫苗免疫应答过程中候选的13种IBDV相关miRNA在不同时间点血清中的表达特性与变化规律,并进一步探索miR-20a-5p及其预测靶基因BCL11B在不同处理组三个时间点（2dpi、5dpi、21dpi）的组织表达特性及体内博弈调控关系。主要研究结果如下:首先,在Dex诱导应激性免疫抑制（Dex组）的2dpi、5dpi、7dpi和28dpi时,血清循环miR-106-5p、miR-146a-5p、miR-21-5p、miR-122-5p、miR-130b-3p、miR-20a-5p等表达水平显著变化;在IBDV弱毒疫苗免疫反应（IBD组）的2dpi、5dpi、7dpi、21dpi、28dpi时,血清循环miR-21-5p、miR-20a-5p、miR-122-5p、miR-130b-3p、miR-6655-5p等积极响应免疫应答;在应激性免疫抑制影响IBDV疫苗免疫应答（Dex+IBD组）中,2dpi、5dpi、7dpi和28dpi为血清循环miR-16-5p、miR-21-5p、miR-122-5p、miR-142-5p、miR-6655-5p等高频变化时间点,并且Dex显著影响免疫反应中miR-20a-5p表达趋势,因此筛选出miR-20a-5p及其预测靶基因BCL11B作为候选靶标进行深入研究。其次,分别研究miR-20a-5p在不同处理组中8种组织脏器的表达特性。在Dex组中,miR-20a-5p主要在心脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体等组织中显著表达;在IBD组中,miR-20a-5p在2dpi与21dpi的法氏囊和盲肠扁桃体中显著表达;在Dex+IBD组中,应激性免疫抑制可能部分通过调控法氏囊、盲肠扁桃体、结肠和心脏中miR-20a-5p表达活性,进而抑制IBDV疫苗免疫应答效应。再次,分别研究BCL11B基因在不同处理组中8种组织脏器的表达特性。在Dex组中,BCL11B基因在脾脏、法氏囊、胸腺、盲肠扁桃体等显著差异表达,并且Dex可能通过上调BCL11B基因表达进而抑制免疫细胞增殖;在IBD组中,BCL11B基因表达水平整体偏低,并可能与胸腺和盲肠扁桃体免疫功能相关;在Dex+IBD组中,应激性免疫抑制可能部分通过调控胸腺和盲肠扁桃体BCL11B基因表达水平,进而抑制IBDV疫苗免疫应答效应。最后,通过综合对比分析Dex组、IBD组、Dex+IBD组在2dpi、5dpi和21dpi多种组织中BCL11B与miR-20a-5p表达水平及博弈关系,结果表明:在Dex组中,miR-20a-5p可能通过负调控BCL11B基因表达,进而参与应激性免疫抑制影响的组织发育和免疫细胞增殖等过程;在IBD组中,miR-20a-5p-BCL11B信号通路在2dpi的脾脏和法氏囊中可能积极参与免疫反应,而在21dpi的胸腺和扁桃体中BCL11B高表达可能与IBDV增殖有关;在Dex+IBD组中,应激性免疫抑制可能通过调控心脏、脾脏、胸腺、法氏囊等组织中miR-20a-5p-BCL11B信号通路的博弈调控关系,进而抑制IBDV疫苗免疫反应。本研究通过对比分析候选IBDV相关miRNA在血清中的表达特性,表明这些循环miRNA是积极参与应激性免疫抑制调控IBDV疫苗免疫应答的关键因子。miR-20a-5p及其预测靶基因BCL11B的组织表达特性分析表明,miR-20a-5p与BCL11B基因在体内应激性免疫抑制影响IBDV疫苗免疫应答中存在显著博弈调控关系。本研究可为深入研究应激性免疫抑制影响IBDV免疫应答的体内功能与分子作用机制提供积极的方向性理论参考。
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