中国南海侧扁软柳珊瑚化学成分及生物活性研究

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软柳珊瑚属(Subergorgia)侧扁软柳珊瑚(S. suberosa)在我国南海海域分布广泛,用药历史悠久。该物种中所含有的次生代谢成分类型多样,主要包括倍半萜类、甾醇类、生物碱类等化合物。部分化合物显示出有意义的抗肿瘤、抗菌、抗捕食等活性。为了寻找结构新颖、具有抗肿瘤活性的化学成分,本论文选择采自中国南海海域的侧扁软柳珊瑚(S. suberosa)作为研究对象,以体外抗肿瘤活性(细胞毒)为导向,综合运用HPLC等多种色谱分离技术及核磁共振(1D及2D NMR),质谱(MS),红外光谱(IR)、紫外光谱(UV)等现代波谱技术从该珊瑚的氯仿-甲醇提取物中分离鉴定了51个化合物,其中包括17个新化合物,另有19个化合物为首次从该种珊瑚中发现。这些化合物主要包括16个9,11-开环甾醇类化合物(CBR-1~CBR-11,CBR-17~CBR-21):subergorgol A(CBR-1),subergorgol B(CBR-2),subergorgolC(CBR-3),subergorgol D(CBR-4), subergorgol E(CBR-5),subergorgol F(CBR-6),subergorgol G(CBR-7),subergorgol H(CBR-8),subergorgol I(CBR-9), subergorgol J (CBR-10), subergorgol K (CBR-11),9,11-seco-3β,6α,11-trihydroxy-5α-cholest-7-en-9-one(CBR-17),9,11-seco-3β,6α,11-trihydroxy-24-methylene-5α-cholest-7-en-9-one (CBR-18),24-nor-9,11-seco-3β,6α,11-trihydroxy-5α-cholest-7,22(E)-dien-9-one(CBR-19),3β,6α,11-trihydroxy-24-methyl-5α-cholest-9,11-seco-7,22(E)-diene-9-one (CBR-20),和3β,6α,11-trihydroxy-24-methyl-5α-cholest-9,11-seco-7-en-9-one (CBR-21),其中化合物CBR-1~CBR-11为新化合物;10个生物碱类化合物(CBR-12~CBR-16,CBR-22~CBR-26):subergorgine A(CBR-12),subergorgine B(CBR-13),subergorgine C(CBR-14),subergorgine D(CBR-15),subergorgine E(CBR-16),尿嘧啶(CBR-22),胸腺嘧啶(CBR-23),尿嘧啶核苷(CBR-24),胸腺嘧啶核苷(CBR-25),次黄嘌呤核苷(CBR-26),其中化合物CBR-12~CBR-16为新化合物;3个脂肪酸和聚酮类化合物:油酸(CBR-27),正十六烷酸(CBR-28)及methyl-3,6-epoxy-4,6,8-triethyl-2,4,9-dodecatrienoate(CBR-29);14个甾醇类化合物:24(β)-甲基-胆甾-5,22-二烯-3β-醇(CBR-30),24(α)-甲基-胆甾-5,22-二烯-3β-醇(CBR-31),胆甾醇(CBR-32),麦角甾-5,24(28)-二烯-3β-醇(CBR-33),胆甾-5,22-二烯-3β-醇(CBR-34),孕甾-3β-羟基-20-酮(CBR-35),孕甾-3β-乙酰氧基-20-酮(CBR-36),孕甾-3,20-二酮(CBR-37),孕甾-4-烯-3,20-二酮(CBR-38),孕甾-1-烯-3,20-二酮(CBR-39),孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮(CBR-40),孕甾-6β-羟基-4-烯-3,20-二酮(CBR-41),孕甾-1,4-二烯-3-酮-20-羧酸甲酯(CBR-42),(3β,5α,6β,22E)-麦角甾-7,22-二烯-3,5,6-三醇(CBR-43);五个倍半萜类化合物suberosenol A(CBR-44),suberosanone(CBR-45),柳珊瑚酸(CBR-46),Subergorgic acid methyl ester(CBR-47),Subergorgic acid ethylester(CBR-48);两个甘油醚:鲨甘醇(CBR-49),3-(二十烷氧基)丙烷-1,2-二醇(CBR-50);一个脂肪醇:正十七醇(CBR-51)。发现的9,11-开环甾醇化合物均具有特征的3β,6α,11-trihydroxy-7-en-9-one-5α-9,11-secosteroid母核,新化合物CBR-1~CBR-11呈现新颖多样的侧链衍生特性,其中化合物CBR-1~CBR-5的20位羟基化,CBR-6和CBR-7的侧链氧化形式为首次发现。新化合物CBR-12~CBR-16则为罕见的嘌呤类倍半萜生物碱,倍半萜母核均为subergane型,碱基部分为嘌呤衍生物,CBR-16的碱基为次黄嘌呤脱氧核苷。新化合物CBR-48推测为部分样品在乙醇中浸泡过程中得到的人工产物。选择人宫颈癌细胞(HeLa)、人乳腺癌细胞株(MDA-MB-231)和人白血病细胞(K562)三种肿瘤细胞株,分别用MTT法和SRB法对部分单体化合物的体外抗肿瘤活性进行了初步评价。活性筛选结果显示CBR-9对K562及MDA-MB-231细胞株有较强的抑制活性,IC50值分别为5.5,6.2μM;CBR-10对K562细胞株也有很好的抑制作用,IC50值为6.5μM。初步显示出该物种潜在的天然药物研究意义。5个嘌呤类倍半萜生物碱的生物活性检测尚在进行中。
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