目的:肺腺癌是当今全球最常见的肿瘤类型之一,危害严重并呈上升趋势,而针对其的治疗方法效果欠佳。如今肿瘤干细胞理论为人们认识和治疗肿瘤带来了新的希望,许多类型肿瘤的肿瘤干细胞相继被按照细胞表面蛋白标记分离出来。可是肺腺癌的肿瘤干细胞却迟迟未能确定,而筛选出合适的表面标记组合是有效分离、鉴定和研究肿瘤干细胞的前提。本实验旨在验证CD133、CD34、CD44作为肺腺癌肿瘤干细胞表面标记物的合理性,为后续的肺腺癌肿瘤干细胞分离工作提供依据,同时也为人肺腺癌肿瘤干细胞标记物确定提供参考。实验方法:本实验利用两种体外培养方法扩增出贴壁细胞和悬浮细胞球两种肿瘤细胞,根据悬浮球肿瘤细胞高度富集肿瘤干细胞的特性再比较CD133、CD34和CD44在两种培养细胞中表达的差异,以确定这三种细胞表面蛋白标记能否作为人肺腺癌肿瘤干细胞的标记物组合。结果:在细胞培养过程中,我们发现悬浮球肿瘤细胞较贴壁肿瘤细胞生长速度慢、维持时间长但成功率低。免疫荧光实验发现CD133、CD34和CD44在悬浮细胞球中表达率和表达量明显高于贴壁肿瘤细胞,即CD133、CD34和CD44在肿瘤干细胞中较一般细胞显著高表达。结论:CD133、CD34和CD44可以作为分离人肺腺癌肿瘤干细胞的表面蛋白表标记组合。