研究目的奥美沙坦是血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂,应用腹主动脉结扎方法建立大鼠左心室肥厚模型,运用高频超声心动图研究奥美沙坦对腹主动脉缩窄术后大鼠左室心肌肥厚和纤维化的防治作用。研究方法39只七周大Wistar大鼠,按随机原则分为假手术组(n=13)和手术组(n=26)。术后10天将手术组大鼠随机分为模型组及奥美沙坦组(1mg/Kg/d灌胃)。连续用药7周后应用高频彩色超声心动图测定麻醉后大鼠心脏,测定指标如下：左室后壁厚度(Left ventricular posterior wall)、室间隔的厚度(Interventricular septal thickness at diastole)、左心室质量(Left ventriclular mass)、左心室质量指数(LVMI)、心率(Heart rate)、左室舒张末期内径(Left ventricular end diastolic dimension)、左室短轴缩短率(Fractional shortening)、左室射血分数(Ejection fraction)。腹部二维超声引导多谱勒血流检测腹主动脉缩窄处血管内径大小和血流速度的快慢。同时也测量假手术组大鼠相同部位的腹主动脉。病理切片HE染色测量心肌细胞直径(myocardial fiber dimension, MFD),苦味酸-天狼猩红染色观察心肌组织纤维病变。研究结果一、高频超声测量心脏指标比较。1.左室后壁厚度模型组左室后壁厚度2.65±0.38mm显著高于假手术组1.82±0.199mm(P<0.001)；经奥美沙坦治疗后左室后壁厚度显著降低(1.85±0.24mm vs2.65±0.38mm,P<0.001),并且与未结扎腹主动脉大鼠比较没有差别(1.85±0.24mm vs1.82±0.199mm,P>0.05)。2.室间隔的厚度模型组与假手术组比较室间隔的厚度显著增加(2.94±0.399vs1.97±0.18mm,P<0.001)；经奥美沙坦治疗后室间隔厚度显著降低(与模型组对比,1.99±0.38mm vs2.94±0.399,P<0.001；与假手术组对比,1.99±0.38mm vs1.97±0.18mm,P>0.05)。3.左心室质量模型组与假手术组比较左心室质量均显著增加(1.72±0.33vs1.296±0.11g，P<0.01)；奥美沙坦治疗组与模型组相比,左心室质量显著降低(1.39±0.18g vs1.72±0.33g,P<0.01),与假手术组比较没有统计学差异(1.39±0.18g vs1.296±0.11g,P>0.05)。4.心率假手术组、模型组、奥美沙坦组心率分别为335.61±74.47bpm、373.88±57.66bpm、392.55±60.21bpm,三组之间数据比较没有统计学差异(P>0.05)。5.左心室舒张末期内径假手术组、模型组、奥美沙坦组LVIDd分别为7.1240.43mm、6.02±1.08mm、7.01±0.39mm。模型组与假手术组比较左心室舒张末期内径显著缩小(6.02±1.08mm vs7.124±0.43mm,P<0.01)；经奥美沙坦治疗后左心室舒张末内径大小恢复正常(与模型组对比,7.01±0.39mm vs7.124±0.43mm,P<0.001；与假手术组对比,7.01±0.39mm vs7.124±0.43mm,P>0.05)。6.左心室短轴缩短率模型组、假手术组、奥美沙坦组左室短轴缩短率分别为41.40±5.74%、43.65±5.0%、43.09±2.899%。从统计学意义上来说,以上不同组别大鼠之间FS比较没有差别(P>0.05)。7.左心室射血分数假手术组、模型组、奥美沙坦组左室射血分数分别为79.51±4.97%、76.98±6.25%、79.28±3.12%。三个组别的EF数值都高于正常值,提示所有大鼠心功能正常,无心功能衰竭情况出现,并且三组之间EF数值没有差异(P>0.05)。8.左心室质量指数模型组与假手术组比较左心室舒张末期内径显著缩小(33.51±4.57vs25.86±1.96,P<0.001)；应用奥美沙坦药物干预后与模型组相比LVMI下降(26.36±3.88vs33.51±4.57,P<0.01),并且与假手术组大鼠比较没有差异(26.36±3.88vs25.86±1.96,P>0.05)。二、腹部多普勒超声检测腹主动脉腹部多普勒超声显示腹主动脉结扎组(包括模型组和奥美沙坦组)动脉结扎处血管内径平均缩窄率65%。主动脉结扎组动脉缩窄部位平均内径0.6±0.07mm,缩窄局部血液流速2.02±0.61m/s；假手术组相对应部位的腹主动脉内径和血液流速数值分别为2.03±0.30mm,0.53±0.13m/s。故腹主动脉结扎后,手术结扎部位的血管腔径变小(0.6±0.07vs2.03±0.30mm,P<0.01),伴随血液流速出现明显增加的现象(2.02±0.61vs0.53±0.13m/s,P<0.01)。三、心脏病理组织学变化。1.MFD的测量值模型组大鼠与假手术组相比出现心肌细胞横径显著变大(19.10±1.08μm vs9.89±0.98μ m,P<0.001),奥美沙坦组心肌细胞横径明显变小(与模型组相比,10.19±1.02u m vs19.10±1.08μ m,P<0.001；与假手术组相比,10.19±1.02μ m vs9.89±0.98μ m,P>0.05)。2.心肌胶原纤维含量假手术组、模型组、奥美沙坦组胶原纤维含量分别为1.7±0.53,8.4±0.96,2.4±0.76。模型组与假手术组相比,大鼠心肌出现大量胶原纤维沉积病变(8.4±0.96vs1.7±0.53,P<0.001)；奥美沙坦药物治疗后,与模型组相比心肌胶原纤维减少(2.4±0.76vs8.4±0.96,P<0.001),但仍没有回归正常(2.4±0.76vs1.7±0.53,P<0.001)。结论腹主动脉结扎术能成功建立左心室肥厚的模型,并且心脏发生心肌肥厚病变的同时出现了心肌纤维化的病变。奥美沙坦酯具有预防高血压左心室发生肥厚病变的功能,同时也能防止心肌出现纤维化病变,说明心肌肥厚病变与心肌纤维化的产生密切相关。本研究结果提示了高血压患者早期应用奥美沙坦对左心室肥厚并纤维化的发生可能具有防治作用,故及早对高血压病人血压进行干预,可以避免心脏发生进一步的病变。研究目的观察左心室肥厚大鼠肾脏损害,探讨奥美沙坦对肾脏损害的保护作用及可能的作用机制。研究方法进行肾脏多普勒超声检查,检测大鼠肾脏形态、大小、回声以及其他病理征象,在二维图像条件下测量肾脏长、宽、厚数值,并测定肾动脉阻力指数(RI)的变化。应用双抗体夹心酶联免疫酶标法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)方法观察血浆和肾脏血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的变化,测定血浆肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾脏组织Masson染色观察大鼠肾脏胶原纤维沉积情况,用免疫组化方法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白。研究结果一、肾脏多普勒超声检查。1.肾脏实质回声肾脏多普勒超声检查显示模型组肾脏实质回声增强,奥美沙坦药物组实质回声同假手术组。2.肾脏大小测定值测定大鼠肾脏长径、前后径、厚度数值,3组间大鼠肾脏大小比较未出现差异。3.肾动脉阻力指数RI模型组与假手术组相比,肾动脉阻力指数RI显著增高(0.71±0.022vs0.41±0.018,p<0.001)；奥美沙坦治疗组肾动脉血流阻力降低(与模型组相比,0.51±0.016vs0.71±0.022,P<0.001；与假手术组相比,(0.51±0.016vs0.41±0.018，P<0.01)。二、血浆、肾脏肾组织中AngⅡ的含量和血浆Scr、BUN的检测1.应用ELISA方法检测血浆AngⅡ模型组与假手术组相比血浆AngⅡ浓度显著升高(1023.2±16.2pg.L-1vs51.31±18.6pg.L-1,P<0.001)；奥美沙坦组与模型组相比,血浆AngⅡ浓度显著降低(192.6±31.6pg.L-1vs1023.2±16.2pg.L-1,P<0.001)；奥美沙坦组与假手术组相比,血浆AngⅡ浓度显著升高(192.6±31.6pg.L-1vs51.31±18.6pg.L-1,P<0.001)2.应用ELISA方法检测肾脏组织AngⅡ模型组与假手术组相比,肾脏组织中AngⅡ浓度显著升高(139.3±16.7pg/Lvs22.4±11.9pg/L,P<0.001)；奥美沙坦组与模型组相比,肾脏组织中AngⅡ浓度显著降低(77.4±9.8pg/L vs139.3±16.7pg/L,P<0.001)；奥美沙坦组与假手术组相比,肾脏组织中Ang Ⅱ浓度显著升高(77.4±9.8pg/L vs22.4±11.9pg/L,P<0.001)3.血浆Scr假手术组、模型组、奥美沙坦组血浆Scr33±3.0umol/L、35±2.0umol/L34±2.8umol/L。从数据统计角度来看上述不同组别大鼠之间Scr未出现差别(P>0.05)。4.血浆BUN假手术组、模型组、奥美沙坦组血浆BUN5.81±2.31mmol/L、6.98±1.98mmol/L、6.30±1.89mmol/L。以上不同组别大鼠之间BUN数据未出现统计差别(P>0.05)。三、肾脏病理组织学变化1.病理组织Masson染色1.1肾小管间质胶原含量模型组与假手术组相比,肾小管间质胶原含量增多(6089.21±976.3vs585.1±131.64,P<0.001)；奥美沙坦组与模型组相比肾小管间质胶原含量显著减少(607.43±138.54vs6089.21±976.3,P<0.001)。奥美沙坦组与假手术组相比,肾小管间质胶原含量没有统计学差别(P>0.05)。所以造模后大鼠肾小管间质出现明显纤维化病变,而应用奥美沙坦药物治疗阻止肾脏发生纤维化病变。1.2肾小管间质损伤模型组与假手术组相比,肾小管间质出现明显损伤病理改变(2.84±0.788vs0.12±0.05,P<0.001),应用奥美沙坦药物治疗后与模型组相比,肾小管间质损伤减轻(1.55±0.41vs2.84±0.788,P<0.001),但是肾小管间质损伤没有恢复到正常(1.55±0.41vs0.12±0.05,P<0.01)。2.1Bax假手术组、模型组、奥美沙坦组Bax测定值分别为1.31±0.42%、4.92±1.23%、2..09±0.39%。模型组与假手术组相比,Bax阳性表达显著增多(4.92±1.23vs1.31±0.42,P<0.001)；奥美沙坦组与模型组相比,Bax阳性表达明显减少(2.09±0.39vs4.92±1.23,P<0.001)；奥美沙坦组与假手术组相比,Bax阳性表达增强(2..09±0.39vs1.31±0.42,P<0.001)2.2Bcl-2模型组与假手术组相比,Bcl-2阳性表达显著增多(4.79±1.21%vs1.76±0.39%,P<0.001)；奥美沙坦组与模型组相比,Bcl-2阳性表达明显减少(2.81±0.42%vs4.79±1.21%,P<0.001)；奥美沙坦组与假手术组相比,Bcl-2阳性表达明显增强(2.81±0.42%vs1.76±0.39%,P<0.001)2.3Bcl-2/Bax模型组与假手术组相比,Bcl-2/Bax阳性表达显著降低(0.92±0.61vs1.52±0.19,P<0.01)；奥美沙坦组与模型组相比,Bcl-2/Bax阳性表达增加(1.41±0.18vs0.92±0.61,P<0.05)；奥美沙坦组与假手术组相比,Bcl-2/Bax比值没有差异(P>0.05)。2.4Caspase-3假手术组、模型组、奥美沙坦组Caspase-3测定值分别为12.15±1.61%、23.41±2.13%、14.54±1.72%。模型组与假手术组相比,Caspase-3阳性表达显著增多(23.41±2.13vs12.15±1.61%,P<0.001)；奥美沙坦组与模型组相比,Caspase-3阳性表达明显减少(14.54±1.72vs23.41±2.13%,P<0.001)；奥美沙坦组与假手术组相比,Caspase-3阳性表达增加(P<0.01)结论1.肾脏多普勒超声检查显示腹主动脉缩窄大鼠肾脏大小无变化,肾脏实质回声增强,肾动脉阻力指数显著增高。应用奥美沙坦药物治疗后,肾脏实质回声无异常,肾动脉阻力指数降低。2.腹主动脉缩窄术后模型组血浆和组织中Ang Ⅱ浓度显著升高,奥美沙坦药物治疗后Ang Ⅱ浓度降低,但仍显著高于正常大鼠浓度。3.腹主动脉缩窄模型组大鼠肾小管间质纤维化程度明显,肾小管间质损伤严重。应用奥美沙坦治疗后肾小管间质纤维化病变消失,’肾小管间质损伤程度减轻。4.腹主动脉缩窄模型组Bax、Bcl-2、Caspase-3在模型组阳性表达显著增多,奥美沙坦组阳性表达明显减少。综上所述,腹主动脉结扎术能导致模型组大鼠肾间质纤维化,奥美沙坦药物治疗能阻止肾间质纤维化的形成,机制可能是药物阻断Ang Ⅱ对肾脏的作用以及抑制凋亡发生。