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目的先天性胫骨假关节(CPT)是以骨不连为主要临床表现的较少见的小儿矫形外科疾病,至今尚无经典理论解释CPT的根本病因及发病机制。目前对于CPT病因的研究多倾向于骨膜的病理改变导致局部骨发育异常,而对CPT形成过程中是否伴有原发性的骨代谢异常的研究尚少。近年来,肽能神经成为国内外学者研究的热点,肽能神经通过释放神经肽类物质参与骨代谢活动,在骨折愈合过程中亦发挥着调节作用。神经肽可通过调节血管活性而影响局部骨血流量,亦可与其成骨细胞和破骨细胞胞浆中相应的受体结合直接调节骨代谢。先天性胫骨假关节形成过程中是否伴有神经肽类物质的异常表达尚无相关研究报道证实。此研究主要是明确神经肽Y和血管活性肠肽在CPT病变骨膜及骨组织中的表达情况,以进一步探索CPT的致病因素及发病机制。方法1.标本收集:标本分为实验组和对照组。实验组标本取材于20例CPT病变骨膜和假关节处的骨组织,患者年龄为6个月-6岁,平均年龄为3.0岁,其中男性患儿14例,女性6例,左侧12例,右侧8例,无双侧患病患儿;对照组为正常骨膜及骨组织,主要取自14例单侧未累及腓骨的CPT患儿的腓骨骨膜和骨组织,6例膝内翻胫骨截骨患儿的骨膜和骨组织,患儿年龄1岁-8岁,平均年龄3岁7个月。2.石蜡切片的制作。3.病变骨膜及骨组织病理切片的HE染色。4.采用SABC法进行NPY、VIP的免疫组化染色。5.数据处理:随机双盲法进行数据采集,应用真彩色医学图像分析软件对免疫组化染色中NPY和VIP的表达结果进行半定量分析,检测NPY和VIP在各组中阳性表达的平均面积(MPA)和平均光密度(MOD),按照Tamas方法检测骨膜血管密度。应用SPSS13.0统计软件,进行t检验分析。结果1 HE染色切片CPT病变骨膜失去正常结构,内含肌纤维母细胞和增生的胶原纤维,排列紊乱,血管少,管壁增厚,管腔狭窄。CPT病变骨组织结构紊乱,骨小梁周围有成骨细胞和破骨细胞分布,可见纤维结缔组织嵌插于骨组织中,以及部分软骨和骨坏死成分。2免疫组化染色切片NPY在骨膜的血管壁及其周围表达,与对照组相比表达增强,存在统计学差异;在成骨细胞和破骨细胞中未见阳性表达。VIP在骨膜的静脉壁及周围,成骨细胞和破骨细胞胞浆中均有阳性表达,VIP在CPT骨膜中表达较对照组减弱,在CPT骨折端破骨细胞中则表达较对照组增强,存在统计学差异。结论NPY和VIP在CPT中存在表达异常,这种异常一方面通过缩小血管管腔,减少新生血管形成,减少骨血流量,造成骨膜局部缺血缺氧,刺激骨膜异常增生,形成纤维缩窄环,压迫局部骨组织影响骨组织重建;另一方面通过VIP刺激破骨细胞活性破坏了骨组织塑型的平衡发展,使骨生长偏向骨吸收的方向,两方面共同影响了CPT中骨的重建,NPY和VIP是导致CPT的因素之一。