白英是茄科（Solanaceae）植物Solanum lyratum Thunb．的干燥全草，主产我国长江以南各省区，具有清热解毒、祛风化痰、祛风湿等功效，用于治疗疟疾、黄疸、水肿、淋病、风湿关节炎、胆囊炎、癌症、子宫颈糜烂、白带、疔毒等。本文主要进行了白英粗提物体内外抗肿瘤作用、有效萃取物的筛选与体内抗肿瘤作用、活性追踪分离化学成分、活性单体化合物-16-妊娠双烯醇酮抗肿瘤作用的分子机制和白英中活性成分含量测定方法的建立等五个方面的研究。本文选取体外培养的人宫颈癌HeLa、人黑色素瘤A375、人乳腺癌MCF7、人肝癌Bel-7402、人胃腺癌SGC-7901、小鼠纤维肉瘤L929和人髓性白血病U937细胞为模型，以半数抑制浓度(IC₅₀)为指标，采用MTT法考察了白英醇提物和水提物对上述肿瘤细胞的生长抑制作用，结果表明，白英醇提物和水提物对上述肿瘤细胞有显著的增殖抑制作用，呈明显的浓度-效应依赖关系；白英醇提物和水提物对各种肿瘤细胞的敏感性不同，其中对SGC-7901、A375、Bel-7402、HeLa、L929细胞的抑制作用较强，对MCF7、U937细胞的抑制作用较弱；对同一种肿瘤细胞白英醇提物的抑制作用明显高于水提物。体内以小鼠移植性肿瘤肝癌H22和肉瘤S180为模型，以抑瘤率为指标，考察了白英醇提物和水提物的体内抗肿瘤作用，结果表明，白英醇提物对小鼠S180肉瘤和小鼠H22肝癌均有较强的抑制作用，高剂量组荷瘤小鼠的平均瘤重明显低于阴性对照组，且抑瘤率大于40％；白英水提物对小鼠S180肉瘤和小鼠H22肝癌均有一定的抑制作用，高剂量组荷瘤小鼠的平均瘤重明显低于阴性对照组，抑瘤率大于30％，可初步认为白英有一定的抗肿瘤作用，且醇提物比水提物的作用强。白英醇提物和水提物对小鼠的急性毒性均很低。本文选取体外培养的人宫颈癌HeLa、人黑色素瘤A375、人乳腺癌MCF7、人肝癌Bel-7402、人胃腺癌SGC-7901和小鼠纤维肉瘤L929细胞为模型，以半数抑制浓度(IC₅₀)为指标，采用MTT法对白英的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水溶性萃取物进行了活性筛选，结果表明，白英乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物对上述肿瘤细胞具有明显的增殖抑制作用，且呈浓度-效应依赖关系；白英乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物对各种肿瘤细胞的敏感性不同，其中对A375和HeLa细胞的抑制作用较强，对SGC-7901和MCF7细胞的抑制作用次之，对Bel-7402和L929细胞的抑制作用较弱；对同一种肿瘤细胞乙酸乙酯萃取物的抑制作用明显高于正丁醇萃取物；石油醚萃取物和水溶性萃取物对肿瘤细胞生长无抑制作用。以小鼠移植性肿瘤肝癌H22和肉瘤S180为模型，以抑瘤率为指标，考察了体外活性萃取物的体内抗肿瘤作用，结果表明，白英乙酸乙酯萃取物有较强的体内抗肿瘤作用，正丁醇萃取物的体内抗肿瘤作用较弱。本文选取体外培养的人宫颈癌HeLa和人黑色素瘤A375为模型，以半数抑制浓度(IC₅₀)为指标，采用MTT法进行抗肿瘤活性追踪，利用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、制备薄层色谱和制备高效液相色谱等分离手段，从白英的乙酸乙酯萃取物分离出16个单体化合物，正丁醇萃取物分离出4个化合物，利用理化性质和光谱学技术，鉴定了15个化合物。其中2，8为新化合物，9为新天然产物，1，3为首次从该属植物中分离得到，4，7，12，14为首次从白英中分离得到。2个新化合物为：16-dehydropregnenolone 3-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→2）-β-D-glucopyranosiduronic acid（2），Diosgenin 3-O-β-D-glucopyranosiduronic acid methyl ester（8）；13个已知化合物为：16-妊娠双烯醇酮（16-Dehydropregnenolone）（1），5α-孕甾烯醇酮（3-hydroxy-5-pregn-16-en-20-one）（3），原儿茶酸（Protocatechuic acid）（4），香草酸（Vanillic acid）（5），咖啡酸（Caffeic acid）（6），薯蓣皂苷元（Diosgenin）（7），Diosgenin 3-O-β-D-glucopyranosiduronic acid（9），Diosgenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→2）-β-D-glucopyranosiduronic acid（10），Diosgenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→2）-β-D-glucuroniduronic acid methyl ester（11），槲皮素（Quercetin）（12），芦丁（Rutin）（13），β-谷甾醇（β-sitosterol）（14），6-甲氧基-7-羟基香豆素（Scopoletin）（15）。采用MTT法测定了13个化合物对体外培养的人宫颈癌HeLa、人黑色素瘤A375、人肝癌Bel-7402和人胃腺癌SGC-7901细胞的体外抗肿瘤活性，结果表明化合物1，7，10，11，12有中等强度的体外抗肿瘤活性，其它化合物无活性。化合物1，10，11的体外抗肿瘤活性为首次发现。本文综合应用了细胞形态学、生物化学和分子生物学的方法对16-妊娠双烯醇酮（16-Dehydropregnenolone）诱导HeLa细胞凋亡机制进行了初步探讨。光学显微镜下观察30μM 16-妊娠双烯醇酮作用于HeLa细胞24 h后细胞体积缩小变圆，产生凋亡小体。30μM 16-妊娠双烯醇酮处理的HeLa细胞经Hoechst 33258荧光染色，显微镜下观察正常细胞全部蓝染，细胞壁完整，16-妊娠双烯醇酮30μM作用细胞24 h后，发现部分细胞发生染色体凝集和质膜出泡，同时可见已破碎的核，有的已形成凋亡小体，对比正常细胞致密的核可推断细胞经历了凋亡性的细胞死亡。在琼脂糖凝胶电泳实验中，30μM 16-妊娠双烯醇酮作用24 h后呈“阶梯状”图谱（DNA ladder），说明16-妊娠双烯醇酮可诱导HeLa细胞发生明显的DNA片段化，即诱导细胞发生凋亡。流式细胞分析结果显示：16-妊娠双烯醇酮处理后的HeLa细胞被阻滞于G₀／G₁期，且呈时间和浓度依赖关系；16-妊娠双烯醇酮作用于HeLa细胞可以检测到亚二倍体峰（Sub-G₁），凋亡细胞数呈时间和浓度依赖关系，说明16-妊娠双烯醇酮是通过周期抑制和诱导细胞凋亡达到体外抗肿瘤作用。Western印迹实验结果表明：16-妊娠双烯醇酮作用于HeLa细胞后，caspase-3的酶原被降解，caspase-3抑制剂可部分抑制细胞死亡；16-妊娠双烯醇酮作用于HeLa细胞12h后caspase-3被活化，ICAD和PARP开始降解，24 h后DNA产生明显的有序化降解（DNA ladder），可知16-妊娠双烯醇酮诱导HeLa细胞凋亡时激活了caspase级联反应；在16-妊娠双烯醇酮诱导的HeLa细胞凋亡中，上调了促凋亡蛋白Bax的表达，下调了抗凋亡蛋白Bcl-2，使Bax／Bcl-2在药物作用后随时间延长而升高，此后caspase-3底物ICAD和PARP被降解，DNA发生片段化，表明16-妊娠双烯醇酮通过增加Bax／Bcl-2的比例，激活以线粒体为中心的信号转导途径而诱导细胞凋亡。本文以首次从白英中分离得到且具有抑制肿瘤细胞增殖活性的两个单体化合物薯蓣皂苷元和16-妊娠双烯醇酮为质控指标建立了高效液相色谱法。薯蓣皂苷元在0.04～0.2 mg·mL^-1范围内呈良好线性关系（r=0.9999），平均回收率为104.5％（RSD=1.4％）；16-妊娠双烯醇酮在5.06～45.54μg·mL^-1范围内呈良好线性关系（r=1.000），平均回收率为98.8％（RSD=1.7％）。该方法简便、快速、重复性好，可以作为白英质量控制的依据。