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目的本研究建立小鼠马兜铃酸肾病模型,通过观察血管内皮细胞生长因子VEGF及其受体Flk1在肾组织的表达,探讨肾微血管内皮细胞损伤在小鼠马兜铃酸肾病肾小管间质纤维化中的作用。同时观察共刺激分子CD40在小鼠肾组织中的表达,探讨马兜铃酸肾病肾小管间质纤维化的免疫病理机制,为其干预治疗提供新的靶分子。方法CD1小鼠腹腔注射马兜铃酸I,分别于第3,10,21,35天处死。收集肾脏标本,分别行HE染色和Masson三色染色,免疫组化染色以及western blot检测。实验结果1.HE染色和Masson染色结果显示:病理变化早期表现为肾小管上皮细胞肿胀,空泡变性,坏死,肾间质基本正常;随着疾病发展,到疾病后期肾小管上皮细胞萎缩,塌陷,部分扩张,肾间质纤维化区域逐渐扩大,肾间质及肾血管周围有大量淋巴细胞浸润。2.免疫组化结果显示: VEGF及其受体Flk1从注射后第3天起,均开始出现明显下调,从第10天起开始恢复,但在肾纤维化区则出现永久性下调改变。CD40在实验组各时间点肾组织的表达量均明显增加,与对照组相比均有统计学差异。3.western blot检测结果显示:VEGF从注射后第3天起,开始出现明显下调,从第10天起开始恢复,与免疫组化结果一致。CD40和α-SMA在实验组各时间点肾组织的表达量均明显增加,与对照组相比均有统计学差异。结论1.应用大剂量马兜铃酸Ⅰ建立小鼠马兜铃酸肾病模型,早期可引起急性肾损伤,后期进入慢性肾小管间质纤维化期。尽管我们没有鉴别是哪一种肾固有细胞转分化,但肾组织α-SMA蛋白的上调性表达提示马兜铃酸可促使肾固有细胞向肌纤维母细胞转分化,参与慢性肾小管间质纤维化过程。2.VEGF及其受体Flk1在肾组织的明显下调,表明肾微血管损伤参与了马兜铃酸肾病肾小管间质纤维化过程。这表明VEGF可维持血管内皮完整性并可能减轻肾小管间质纤维化。3.CD40在肾组织的上调性表达,表明在马兜铃酸肾病中有免疫机制存在,同时也为此病的特异性免疫治疗提供了可能的靶分子。