中药骨碎补，是水龙骨科植物槲蕨或中华槲蕨的干燥根茎，是中医中常采用的治疗骨骼疾病的单方药。骨碎补在骨细胞和骨缺失的动物模型中起着积极的作用。但是到底是骨碎补的何种有效成分在起作用，至今难以确定。很多努力的方向就是从骨碎补粗提物中提取有效成分。多项研究表明总黄酮是骨碎补的主要活性有效部位。柚皮苷是黄酮类的一种化合物，它有抗氧化、抗癌和降低胆固醇的作用。同时，柚皮苷也是骨碎补的主要成分之一。但是关于单独柚皮苷作用于骨诱导的研究甚少。故本实验主要研究柚皮苷对于成骨细胞的增殖、分化、钙化的作用。 目的： 检测柚皮苷提取液对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和钙化的影响。 方法： 以成骨细胞株MC3T3-E1细胞为体外药效的试验模型，通过CCK-8法观察各种浓度的柚皮苷溶液对MC3T3-E1细胞增殖能力的影响；通过乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase，LDH)细胞毒性试验观察各种浓度的柚皮苷溶液对细胞毒性能力的影响。通过骨形成蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2，BMP-2，碱性磷酸酶(Alkali phosphme，ALP)活性测定和骨钙素(Osteocalin)含量测定观察柚皮苷溶液对MC3T3-E1细胞分化能力的影响；通过Von kossa钙化染色法观察柚皮苷溶液对MC3T3-E1细胞钙化能力的影响。 结果： CCK-8法结果表明：高浓度的柚皮苷溶液在12h和24h时能促进MC3T3-E1细胞的增殖作用。而低浓度的柚皮苷溶液则无此作用。但是48h时各个浓度的柚皮苷溶液均不能促进细胞增殖。细胞毒性测定(LDH test)结果表明：所测的各个组别细胞毒性百分比都较小，且随着时间的推移(12h，24h，48h)变化较小。光镜下观察各个时间点细胞的密度和形态也未发生明显的变化。 BMP-2细胞免疫化学结果表明：24h时，所选取的三组柚皮苷浓度10UM，1UM，0.1UM包浆内棕色着色比对照组明显。12h时，柚皮苷作用组和对照组无明显区别。48h时所得的结果与24h的结果相似。 ALP检测结果表明：48h时，1UM和0.1UM的柚皮苷溶液可提高MC3T3细胞的ALP活性(P<0.05)。72h时，0.1UM的柚皮苷溶液可提高MC3T3细胞的ALP活性(P<0.05)。 OC检测结果表明：4d和8d时，三组柚皮苷溶液作用组与对照组相比OC活性都有所提高，虽然未达到统计学意义。而12d时，10UM和1UM柚皮苷溶液作用组与对照组相比OC活性明显提高(P<0.05)。0.1UM的作用组则无此作用。 Vonkossa染色钙化面积百分比结果表明：三组柚皮苷溶液作用组与对照组相比无明显区别。 结论： 柚皮苷溶液可以提高成骨细胞株MC3T3-E1增殖能力和分化能力。