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近年来随着艾滋病及继发性免疫抑制疾病的增多,淋巴瘤的发病率显示逐年上升的趋势。其中弥漫性大B细胞淋巴瘤占了很大的比例。由于细胞遗传学和分子生物学技术的快速发展,人们对各型弥漫性大B细胞淋巴瘤特异表达的、并与其发生、发展、治疗、预后等相关的免疫分子的认识及研究日趋深入。
为了了解人弥漫性大B细胞淋巴瘤的相关分子的表达,我们选择了人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞株OCI-Lyl9。通过对人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞株OCI-Lyl9细胞进行体外培养,并取对数生长期细胞,流式细胞仪检测其相关抗原CD19、CD20、CD24、CD38、C-Met、Ki-67、CD81、Bcl-2、Survivin等的表达。
弥漫性淋巴瘤有显著异质性,而且其发生、发展过程中,存在播散性,说明免疫功能在其发生、发展过程中发挥很大作用。因此仅通过体外培养的方法,无法反映体内弥漫性大B细胞淋巴瘤生物学行为,我们尝试构建入弥漫性大B细胞淋巴瘤的动物模型。我们把在体外培养的,处于对数生长期的人弥漫性大B细胞淋巴瘤OCI-Lyl9细胞进行收集,并接种至6只SCID小鼠。在右侧腋中线与肋骨下缘交点,进行皮下注射接种。接种的OCI-Lyl9的细胞数为1*107/O.lml每只注射0.lml,总细胞数为1*107个/只。另设2只为正常组。注射后每日观察动物成瘤情况、荷瘤小鼠一般状况,发现成瘤后,每日游标卡尺量肿瘤大小并以公式V=1/2ab2(a为长径,b为短径)计算肿瘤体积,并绘制肿瘤生长曲线,直至处死小鼠;天平称荷瘤小鼠的体重,绘制体重增长曲线。在接种后第37天处死SCID小鼠,取瘤组织进行固定、脱水、石蜡包埋、4μm病理切片、HE染色。
六只SCID小鼠中,有三只成瘤。荷瘤小鼠成瘤时间为26±1.732天,成瘤率为50%。荷瘤小鼠成瘤后肿瘤生长呈先慢后快的趋势。与文献报道过的S型肿瘤动物模型中的肿瘤生长曲线基本吻合。取材时观察小鼠瘤组织,除局部接种部位皮下有一实体瘤组织外,未发现转移瘤组织。
结论是,弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞株OCI-Ly19的不同抗原表达量不同:在gate了CD19阳性的细胞中CD20、CD24、CD38、CD81、C-Met、Ki-67、Bc1-2、Survivin的阳性率各为79.6%、42.2%、99.2%、72.3%、2.8%、2.1%、18.3%、3.4%。应用人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞株OCI-Ly19成功建立人DLBCL的B细胞小鼠模型。