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实验目的随着纳米药物载药系统(NDDS)受到越来越多的关注,也暴露出许多问题,当纳米载药系统进入机体后,很容易被机体的内皮网状系统,尤其是肝脏中的巨噬细胞所吞噬,致使药物不能有效的到达病灶部位。为了避免系统循环给药的纳米载体在体内被吞噬的命运,本课题利用紫杉醇为模型药物,利用生物可降解材料PLGA将其制备成纳米颗粒,探讨采用氯磷酸钠清除机体中的巨噬细胞,尤其是肝脏中的巨噬细胞后对纳米颗粒体内分布情况的影响,以期提高药物在血液中的浓度,改善分布特征,增强纳米制剂的疗效。本课题拟制备紫杉醇纳米颗粒,然后利用氯磷酸钠脂质体清除巨噬细胞的特点,摆脱易被清除的命运,提高药物浓度,增加长循环,增加生物利用度。研究方法1)以紫杉醇(PTX)为模型药物,以PLGA为囊材,采用改良的W/O/W方法制备PTX-PLGA纳米颗粒。2)利用薄膜蒸发法制备氯膦酸钠脂质体。3)以小鼠为实验模型,分别于不同时间点(day1-day14)小鼠尾静脉注射制备的脂质体,取小鼠肝脏以及脾脏制备单细胞,流式染色FACS分析不同时间点的小鼠肝脏以及脾脏内巨噬细胞的清除情况。以小鼠为动物模型,采用HPLC检测注射氯膦酸钠脂质体后,紫杉醇纳米颗粒血药浓度以及组织分布的影响。4)以肿瘤小鼠为动物模型,检测注射氯膦酸脂质体后,紫杉醇纳米颗粒的抗肿瘤效果的影响。以及检测对肝肾功能的影响。结果1)通过w/o/w的方法制备的紫杉醇PLGA纳米颗粒,可制备出较包封率较好的PTX-PLGA纳米粒。2)通过制备的脂质体的效率来看,86mg卵磷脂,8mg胆固醇,以及10ml的氯仿得到的脂质体清除效率最好3)我们利用制得的脂质体,结果表明通过流式细胞仪检测发现,注射氯磷酸钠脂质体后,肝脏以及脾脏中巨噬细胞清除效果明显,第一天清除效果最佳。4)药动学及组织分布结果表明,清除掉巨噬细胞后,纳米颗粒在体内消除速度变慢,半衰期明显延长,更少的在肝脏以及脾脏中聚集,更多的分布在血液中,增加了长循环5)药效学研究结果表明,经过清除巨噬细胞之后,纳米颗粒表现出更强的抗肿瘤效果,肿瘤体积,重量明显减小。血液检测指标显示:清除巨噬细胞后,药物更少在肝脏积累,降低了对肝脏的损伤。结论通过制备的氯磷酸钠脂质体可以清除肝脏与脾脏的巨噬细胞,可以提高以紫杉醇为模型药物,制备的纳米药物的生物利用度,本课题提出以清除巨噬细胞,降低巨噬细胞对纳米颗粒的吞噬的特点,避开肝脏对药物的吞噬效果,提高药物的半衰期,有利于发挥长循环的特点。