多西他赛是一种半合成紫杉类化合物,通过干扰细胞有丝分裂和分裂间期细胞功能所必需的微管网络而起抗肿瘤作用。由于多西他赛水溶性差,因此现阶段是将多西他赛溶于吐温80制成注射液用于临床。多西他赛注射液在使用中出现了过敏反应、体液潴留等严重的毒副反应,而这些毒性反应部分是由制剂中的吐温80引起的,因此开发去除吐温80的多西他赛脂质体制剂将大大有利于临床的使用。目的:通过开发多西他赛脂质体,有效去除多西他赛现有制剂中的吐温80,并通过FA等辅料的修饰,延长药物在体内的循环时间,增加药物在肿瘤组织的分布,从而达到降低多西他赛毒副作用和增强其疗效的目的。方法:(1)对多西他赛脂质体包封率、粒径和Zeta电位等重要质量指标的检测方法进行了研究。(2)对多西他赛脂质体进行了处方前研究,包括多西他赛的稳定性、溶解度、以及在不同PH值下的LogP。(3)在研究比较不同制备方法的基础上,确定薄膜分散法制备多西他赛脂质体,并对其关键制备工艺条件进行了优化;以包封率为指标,通过单因素和正交试验筛选出了最佳处方,并考察了 FA和胆固醇的用量对多西他赛脂质体体外释放的影响。(4)以冻干脂质体的外观和复溶后的粒径分布为指标,考察了多西他赛脂质体的冻干工艺,同时考察了不同种类和浓度的冻干保护剂对产品的保护作用。(5)对建立多西他赛冻干脂质体质量标准的各项进行了研究,并根据质量标准对多西他赛脂质体的稳定进行了考察。(6)以ICR小鼠的S180移植瘤为模型,考察了多西他赛脂质体的药效。(7)用ICR荷瘤小鼠对多西他赛脂质体药代动力学性质、肿瘤组织分布及骨髓分布进行了初步研究,并和市售多西他赛注射液进行了比较。结果:(1)建立了 HPLC法测定多西他赛脂质体药物含量的方法,建立了 Sephadex G-50柱测定包封率的方法,并建立了多西他赛脂质体粒径和Zeta电位的测定方法。(2)多西他赛在光照和高温条件下不稳定,在高湿条件下稳定;多西他赛在甲醇和丙酮中溶解,在乙醇和氯仿中略溶,在水中几乎不溶;多西他赛的LogP为3.26。(3)优化出的多西他赛脂质体关键工艺条件:乙醇为成膜介质,制膜温度为50℃,制膜转速为100r/min,均质后分别挤压过0.2、0.1μm膜各3次来控制粒径;多西他赛脂质体最佳处方组成为多西他赛(DOC)、卵磷脂(EPC)、胆固醇(CHOL)、二肉豆蔻酰磷脂酸(DMPA)和辅料A(FA),其中药与总脂摩尔比为1:26,CHOL与EPC摩尔比为1:12,FA总脂摩尔百分含量为1.5%;处方中CHOL的用量对多西他赛脂质体的体外释放率有显著影响,而FA的用量对体外释放率无明显影响。(4)多西他赛脂质体最优冻干工艺为预冻温度-42℃,预冻速度为快速降温,升华干燥19h,解析干燥9h,20%海藻糖为最佳冻干保护剂。(5)建立起了多西他赛冻干脂质体的质量标准。稳定性研究表明,多西他赛脂质体在高温和光照条件下性质不稳定,在4℃～8℃条件下避光贮藏24个月性质稳定。(6)药效学研究结果显示,FA总脂摩尔百分含量为1.5%的多西他赛脂质体抑瘤率最高,与市售多西他赛注射液的抑瘤率相当。(7)多西他赛脂质体在荷瘤小鼠体内半衰期T1/2为330min,普通注射剂为210min,AUC为4367μg*min/ml,是普通注射剂(1297.5μg*min/ml)的3.4倍,提示脂质体从体内消除显著减慢;荷瘤小鼠瘤组织中多西他赛浓度明显高于普通多西他赛注射剂,提示多西他赛脂质体对肿瘤组织具有一定的靶向性;荷瘤小鼠骨髓中多西他赛浓度与普通多西他赛注射剂相比无显著性差异,提示脂质体不会增强骨髓毒性。结论:本研究制备的多西他赛脂质体性能良好,工艺稳定,重现性好,体内初步研究表明具有较长的循环时间,良好的瘤组织分布以及抑瘤活性,有望开发成为新药。