侧耳菌紫外诱变选育及发酵玉米秸秆营养价值的评定

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黑龙江省草食家畜逐年增加,但优质粗饲料短缺成为了限制其发展的重要因素之一。另外黑龙江省秸秆产量大,来源丰富,可以成为主要粗饲料来源,但未经处理的秸秆其细胞壁中粗纤维特殊结构导致家畜采食量和消化率低,造成能源浪费。侧耳菌(Pleurotus ostreatus)俗称平菇是白腐真菌的一种,以其处理秸秆能降解木质素,打破这种特殊结构,提高消化率。但是,自然挑选的菌种处理效果良莠不齐,生长速度慢,产酶活性较低,而且北方地区天气寒冷影响了菌丝的生长和产酶活性,导致处理效果不理想。本研究采用物理诱变方法,对已筛选出的侧耳菌菌种进行紫外诱变,通过测定生长速度、纤维降解率及酶活性筛选出纤维降解能力强、耐低温的优良菌种,从而为提高秸秆饲料营养价值,适合北方地区的秸秆处理提供理论依据。试验一:比较不同品种平菇处理玉米秸秆效果,筛选出优秀菌种。以4种平菇处理秸秆,测定菌丝生长速度、常规营养成分变化及干物质(DM)0~72h体外降解率。结果表明:生长速度从快到慢依次为平菇2号,109,平菇2003,农平15;平菇2号处理20、30d秸秆中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)含量均低于其他各处理组,粗蛋白(CP)极显著高于109、平菇2003(P<0.01);平菇2号处理20d提高秸秆DM有效降解率42.96%,极显著高于平菇2003、农平15(P<0.01)。平菇2号为本试验筛选出生长速度快及纤维降解能力强的菌种。试验二:通过紫外诱变育种技术获得优秀纤维降解菌株开发秸秆资源。以侧耳菌为出发菌株,采用紫外诱变技术处理,比较纤维降解率及产酶活性筛选高效纤维降解菌株。结果表明:以紫外照射30s为最佳诱变剂量,连续诱变10批,共挑出萌发菌株194株,正突变为26株,正突变率为13.4%,其中菌株P89,木质素过氧化酶(LiP)、漆酶(Lac)分别为出发菌2.03倍、1.89倍,生长速度提高18.21%,木质素降解率提高51.77%。菌株P89为本研究诱变筛选获得的处理秸秆饲料优秀菌株。试验三:恒温与变温对诱变菌株发酵玉米秸秆的影响。分别以25℃恒温和室内自然温度(处理时间为9月28~10月28日,室内温度为12~23℃),培养侧耳菌秸秆发酵袋,比较菌丝长满袋天数、纤维降解率、干物质消失率。试验分组为:出发菌恒温组、诱变菌恒温组、诱变菌变温组。研究结果表明,出发菌长满袋时间为22~23d,诱变菌株恒温组为16~17d,诱变菌株变温组为19~20天,诱变菌株能明显提高菌丝生长速度。处理20天发酵秸秆干物质48h消失率出发菌恒温与诱变菌变温处理组差异不显著(P>0.05),诱变菌恒温处理组极显著高于其他两组(P<0.01)。
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