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目的:FAM83D又名C20Orf129或CHICA,是一种纺锤丝结合蛋白,在乳腺癌、肝癌等肿瘤中存在异常表达,并且影响肿瘤的发展和预后,这提示FAM83D在肿瘤的发生发展中起到重要的生物学作用。在胃癌和结肠癌中,FAM83D发挥的生物学作用和具体机制目前仍不明确。本课题拟从胃癌组织和癌旁非肿瘤组织中FAM83D的蛋白表达水平研究入手,明确其在组织中的表达情况以及与临床病理之间的联系。通过上调和下调胃癌细胞中的FAM83D表达水平探索FAM83D对胃癌细胞增殖、转移能力的影响;建立实验动物模型进行验证,并探索其在胃癌中影响增殖的的分子机制。方法:分析GEO数据库中的2个胃癌数据集,分析在肿瘤组织和癌旁非肿瘤组织中FAM83D的表达情况。以免疫组织化学方法(IHC)检测102例胃癌病人术后标本中肿瘤组织和癌旁非肿瘤组织中FAM83D的蛋白的表达,并分析蛋白表达与相对应的临床病理参数的关系。运用转染病毒构建过表达FAM83D的稳定转染细胞株HS-746T、AGS,运用RNAi技术转染FAM83D si RNA敲低细胞株AGS、SCG-7901中FAM83D蛋白水平,并通过Western blot验证效果。平板克隆、CCK8、流式细胞周期实验检测FAM83D过表达、敲低后对胃癌细胞增殖能力、细胞周期的改变;细胞划痕实验、细胞迁移实验、细胞侵袭实验检测对胃癌细胞划痕愈合、迁移、侵袭能力的改变;通过裸鼠皮下成瘤、腹腔成瘤模型检测FAM83D过表达后746T细胞在裸鼠体内转移瘤结节形成的改变。运用流式周期实验检测FAM83D的蛋白表达随细胞周期进程的变化情况。通过微管重生长实验观察敲低FAM83D对微管生长的影响。免疫共沉淀(CO-IP)技术检测FAM83D、HMMR、TPX2、AURKA间的蛋白间相互作用、与微管蛋白的相互作用关系。结果:在胃癌术后标本中,FAM83D在肿瘤组织中的表达水平较配对癌旁组织明显增高(P<0.05),在胃癌组织中的过表达与胃癌的淋巴结转移(P=0.006)、TNM分期(P<0.001)相关,而与其他临床病理参数无明显联系。同时,细胞学、动物学实验表明,过表达该基因可促进肿瘤细胞的增殖、细胞周期的变化、肿瘤的迁移侵袭(P<0.05)。此外,FAM83D可通过影响细胞周期中的G2/M期对细胞增殖产生促进作用。通过免疫荧光、免疫共沉淀实验发现在有丝分裂期FAM83D与一系列细胞周期相关蛋白,如HMMR,TPX2,AURKA等在纺锤体微管结构上可以共定位。因此,FAM83D对周期与增殖的调控可能与蛋白间相互作用有关。结论:FAM83D在胃癌组织中的表达明显升高,表达水平与肿瘤组织的淋巴结转移、TNM分期相关;上调FAM83D表达水平能促进胃癌细胞的增殖、转移能力,干扰下调后出现相反变化;FAM83D可能通过和HMMR、TPX2、AURKA的蛋白间相互作用参与调控了胃癌的增殖过程。