该工作是以原代大鼠肝细胞为研究对象,通过对肝细胞生长方式、生长所需的培养基 和细胞外基质底物等生长条件和培养方法的筛选,选择合适的培养条件,使肝细胞可以保持良好的生长状态和较高的生理活性,为进一步提高杂化人工肝支持系统的肝细胞密度和效率打下基础.在该论文工作过程中研究人员得到了如下研究结果:以大鼠的肝脏为肝细胞供体,采用改进的胶原酶原位灌流法对原代肝细胞进行分离,可以得到收率高、形态好、存活率高的原代肝细胞.使用胶原、明胶、多聚赖氨酸、壳多糖作为细胞外基质底物进行原代肝细胞单层培养.实验表明上述物质有利于肝细胞的附着,使细胞保持较高的生理活性和较好的细胞形态.使用琼脂和Poly-HEMA作为细胞外基底物,激素限定培养基为培养物质进行肝细 胞聚集体培养.用非贴壁材料琼脂为原料制备了琼脂微载体,并对微载体表面进行了化学修饰.发现己二胺修饰的表面带正电荷的琼微载体有利于肝细胞的附着.制备了不同脱乙酰化度的壳聚糖.用牛血清培养基进行微载体的间歇振荡培养,研究肝细胞在不同的壳聚糖微载体表面的形态,代谢功能.发现肝细胞在壳聚糖微载体表面附着的数量,与多聚赖氨酸包裹与否没有明显的关系.制备了不同直径、孔径的明胶微载体,用牛血清培养基进行微载体的间歇振荡培养.采取牛血清培养基,通过连续旋转培养,促使肝细胞在明胶微载体上形成聚集体.综上所述,肝细胞的形态和生物活性是与细胞外基质的组成、物理化学物质、形貌,培养条件,培养方法等密切相关的.在体外研究细胞与材料的相互作用对于阐述生命现象是非常有意义的.