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L-谷氨酸氧化酶(EC1.4.3.11 Gox)是以黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)为辅基的一种黄素酶，它能特异的催化立体异构的L-谷氨酸氧化脱氨基，生成α-酮戊二酸、H2O2和氨。而纤维素结合域(CBD)能特异的结合在纤维素载体上，对纤维素没有催化作用。作为一种大量存在，并具有潜在应用的可再生能源，它具有结合量大、结合特异性强等特性。通过融合蛋白表达，将目的蛋白固定化纤维素基质上，从而发挥融合蛋白的功能及作用。本论文以现有的谷氨酸氧化酶基因进行了克隆、异源表达、纯化和相关酶学特性测定，并对Gox的固定化进行了初步的探索研究。 本论文通过构建表达载体pET-24a(+)-Gox和pETM-10-Gox-CBD，经大肠杆菌诱导表达条件优化获得目的蛋白重组蛋白L-谷氨酸氧化酶(Gox)和L-谷氨酸氧化酶与纤维素结合域的融合蛋白(Gox-CBD)。在酶活性研究中发现，Gox在大肠杆菌异源表达时，可形成足够量的辅基FAD，而且辅基在分离过程中不易脱落，不需要额外添加。在4℃条件下结合4h，融合蛋白Gox-CBD充分结合吸附到结晶纤维素上的量约为9.0mg/g。对异源表达的Gox、游离的Gox-CBD和固定化的Gox-CBD进行酶活特性测定，并进行了比较发现，固定化酶Gox-CBD相对于重组蛋白Gox的比酶活略有降低，但在热稳定性上固定化酶比游离酶提高了很多，在60℃放置30min后还保留有75％的活性，而游离酶则完全丧失了活性。与此同时，将破碎的大肠杆菌离心上清液直接进行一步纯化Gox-CBD的纯化实验操作，SDS-PAGE验证显示，可以获得比较纯的Gox-CBD。 Gox作为黄素酶的一种，它的应用范围较为广泛。Gox的异源表达表明:可以通过大肠杆菌的表达系统表达有活性的酶蛋白。通过一步纯化操作，可以将融合有纤维素结合域的L-谷氨酸氧化酶结合到微晶纤维素上，其操作方便，特异性强，并且经济实惠，与重组L-谷氨酸氧化酶相比，其比酶活无明显变化。通过融合表达Gox的方法，并对固定到纤维素上的L-谷氨酸氧化酶酶学特性进行了初步的探索，为后续的生物传感器的应用、α-酮酸的制备等方面提供了理论基础。