球囊机械应力脑损伤大鼠模型的建立与神经纤维束损伤病理学观察

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背景自发性脑出血是指非外伤导致的颅内血管破裂,引起颅内出血。自发性脑出血预后差,尚无公认的治疗手段。其致伤作用包括原发性损伤和继发性损伤。在急性期原发性损伤中,血肿机械应力对周围脑组织的损伤是主要的致伤因素。目前国内外关于脑出血后血肿机械应力对脑组织损伤的研究甚少,其原因之一就是缺乏稳定有效的动物模型。目的建立大鼠脑出血急性期脑机械应力损伤模型,观察神经功能评分及病理变化,评价该模型准确性、重复性和一致性。方法将65只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=15)、25μl球囊组(n=25)、50μl球囊组(n=25)。分别在大鼠脑基底节区植入50μl、25μl、50μl空瘪球囊。麻醉清醒后,使用Longa神经功能评分排除神经功能明显受损的大鼠(Longa评分≥1分),纳入的大鼠中,随机选取假手术组10只、25μl球囊组10只、50μl球囊组10只,使用压力泵10s内分别将25μl球囊组和50μl球囊组的球囊充胀,模拟脑出血迅速起病。对24h生存率、行为学评分进行观察。剩余大鼠(假手术组5只,25μl球囊组5只,50μl球囊组5只),使用磁共振成像T2加权像、弥散张量成像、HE染色、铁苏木精染色、免疫荧光等方法,进行病理学观察,评价模型的准确性、稳定性和可重复性,并分析不同大小球囊损伤对大鼠神经纤维束的损伤情况。结果成功制作大鼠脑机械机械应力损伤模型。假手术组、25和50μl球囊组的24h生存率分别为100%、90%、0%,三者存在显著差异(P<0.01)。球囊充胀后,三组大鼠行为学存在明显差异(P<0.01),球囊越大神经功能损伤越严重。MRI T2加权像、HE染色提示50μl球囊组损伤面积大于25μl球囊组(P<0.01)。铁苏木精染色、DTI、MBP免疫荧光染色显示50μl球囊组神经纤维束损伤比25μl球囊组的严重(P<0.01)。结论大鼠急性机械应力损伤模型能较准确模拟脑出血急性期机械应力损伤。在脑出血急性期,机械应力损伤导致神经纤维束损伤,其损伤程度与时间和球囊大小相关。
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