指甲作为皮肤的附属组织,具有保护指端、辅助指端捏持、增强指腹感觉的作用,并可辅助手指完成一些日常生活中的特殊动作;同时指甲也是人体美容的重要修饰部分。按照传统的手功能损害评定标准,指甲缺损并不造成手功能的丧失,但随着人们生活水平的日益提高及社交活动的增加,越来越多的患者要求修复指甲缺损,因此甲床缺损的修复显得尤为重要。目前,临床上治疗甲床缺损,通常是行植皮术、皮瓣修复术、甲床移植术及甲瓣移植术,这些手术的结果,多为新生的指甲不美观、不能生长指甲或是以牺牲另外的指甲或趾甲为代价。因此,如何满意地修复甲床缺损以形成满意的指甲,是手外科临床上未能解决的难题之一。本研究借鉴皮肤组织工程的方法,在体外构建组织工程甲床,为甲床替代物的研究及移植奠定了理论基础和提供了实验依据。1.采用胰蛋白酶分次消化法解离甲床上皮细胞,胶原蛋白酶解离甲床成纤维细胞,所得的细胞纯度高并能传代,连续观察,细胞在体外的性状及生长规律稳定,可以作为组织工程的种子细胞。2.结合低浓度胰蛋白酶消化和反复冻融法处理皮片能完全脱去细胞成分,又避免对真皮胶原蛋白的潜在损伤,保留了真皮的正常胶原结构,基底膜完整,可以作为组织工程的支架。3.甲床细胞接种于脱细胞真皮基质后,增殖良好,基底膜完整,上皮分层,可区分上皮层次,类似正常的甲床组织结构。4.甲床成纤维细胞和上皮细胞复合种于脱细胞真皮基质后,对上皮细胞的增殖和分化未见明显影响。本研究证实了应用组织工程方法在体外构建组织工程甲床的可行性,为甲床替代物的应用研究,奠定了理论基础。