背景腮腺多形性腺瘤(pleomorphic adenoma, PA)又称混合瘤,是临床上最常见的腮腺良性肿瘤,约占腮腺肿瘤的60%-70%。由于其无完整包膜,术后易于复发,多次复发后有恶变倾向,因此,尽早彻底手术切除对防止多形性腺瘤恶变有着重要意义。PA的手术方式主要有肿瘤剜除术、腮腺浅叶及全腮腺切除术、腮腺区域性切除术。单纯肿瘤剜除术未能切除肿瘤包膜,创伤小,并发症少,术后复发率高。长期以来腮腺浅叶切除术是腮腺浅叶多形性腺瘤的标准术式,并逐渐发展为包括腮腺浅叶切除术和全腮腺切除术在内的术式,该术式术后复发率小于0.3%-4.0%,但该术式创伤大,腮腺主导管的结扎和面神经的易损伤性可造成面部畸形、暂时性面瘫和Frey综合症。随着功能性外科理念的引入,目前腮腺区域性切除术越来越受欢迎,与腮腺浅叶切除术相比,区域性切除术仅涉及距离肿瘤较近的个别面神经的分支,减少了面瘫的发生率,且可保留腮腺主导管,大大减少了面部术后凹陷畸形和Frey综合症的发生。鉴于腮腺区域性切除术的较多优点,该术式目前已经被广泛采用。但如何更好的界定外科安全手术边缘一直困扰着众多学者。临床上评估安全切缘主要靠术前影像学表现、术中肉眼观察及中冰冻切片结果。影像学检查对腮腺肿块大小、形态、内部回声、毗邻关系、性质可做出较准确诊断,但对于多形性腺瘤伪足和卫星灶诊断不敏感。术中肉眼评估主观性较强、误差较大,不适用于精确切缘评价。术中冰冻切片尽管被认为是目前最可靠的判定切缘状态的手段,但由于PA包膜的病理解剖学特性,在有肿瘤卫星灶的情况下,行包膜外切除术或较小范围的区域切除术时,冰冻切缘可能为正常腮腺或脂肪组织,卫星灶可能残留,从而导致术后复发。因此,为求彻底治愈的同时防止过度治疗,探求一种更为准确的判定方法以明确手术切缘性质具有重要的研究价值和临床意义。各种疾病的发展过程中往往有蛋白质的动态变化,肿瘤在其不同的发病阶段,即使在没有任何临床症状的早期,在蛋白质水平方面就已经发生了变化,而这些被确认在早期发生的蛋白质变化都有可能发展成为临床判定手术边缘指标,因此,寻找有效的分子指标以帮助判定安全手术切缘是目前研究的热点。Ki-67是一种细胞增殖活性相关抗原,有研究发现Ki-67在PA瘤旁组织(肿瘤外1.0cm)的表达显著低于肿瘤组织,并认为该蛋白可作为PA实施区域切除术时的安全切除界定指标,但其可靠性和灵敏性尚未得到证实。水通道蛋白(water channelaquaporin, AQP)是一类可介导自由水快速被动转运的跨生物膜蛋白,迄今已发现哺乳动物AQP13种。随着对其研究的不断深入,发现AQP1和AQP5不仅能介导水及离子转运,还对细胞内外气体交换、肿瘤血管的生成及细胞迁移产生重要影响,近年来受到越来越多的关注。目前,对唾液腺肿瘤组织及周边组织中的水通道蛋白的表达并无相关研究,为了明确AQP1和AQP5在PA组织及瘤周组织中的表达和分布,本课题对多形性腺瘤组织及瘤周组织中的AQP1和AQP5 mRNA和蛋白水平进行检测,以探讨其在PA发生发展中的作用和临床意义。目的探讨AQP1、AQP5在PA发生发展中的作用,是否可作为确定PA手术安全边界的参考指标,并与Ki67比较其灵敏性。方法采用RT-PCR分别检测AQP1、AQP5、Ki-67 mRNA在30例原发性PA患者瘤体组织(A组)、瘤旁0.5cm(B组)、1cm(C组)、1.5cm(D组)、2.0cm(E组)中的表达水平,同时应用免疫组化方法检测上述不同组别的石蜡组织标本中AQP1、AQP5、Ki-67蛋白的表达情况,最后行统计分析。结果RT-PCR及免疫组化结果显示：AQPI和AQP5在各组中均有表达,尤其是在多形性腺瘤肿瘤组织中的表达最高,并随着与瘤体中心距离的增加,其表达量呈下降趋势。组间比较发现,A组与B组、C组间差异均没有统计学意义(P>0.05),即AQP1和AQP5的表达在瘤体与瘤周0.5 cm、1 cm的组织没有显著性差异；A组、B组、C组分别与D对比,差异均有统计学意义(P<0.05),即瘤体、瘤周0.5 cm、1 cm的组织与瘤周1.5 cm组织的AQP1和AQP5表达有显著性差异。D组和E组相比,差异无统计学意义(P>0.05),即瘤周1.5 cm和2.0 cm的组织之间该两种蛋白的表达无显著性差异。Ki-67在各组中均有表达,在多形性腺瘤肿瘤组织中的表达最高,随着与瘤体中心距离的增加,其表达量呈下降趋势。组间比较发现,A组与B组间差异均没有统计学意义(P>0.05),即Ki-67的表达在瘤体与瘤周0.5 cm的组织没有显著性差异；A组、B组与C组分别对比,差异有统计学意义(P<0.05),即瘤体、瘤周0.5 cm的组织与瘤周1.0 cm组织的Ki-67表达有显著性差异。C组与D组、E组分别相比,差异均无统计学意义(P>0.05),即瘤周1.0 cm和1.5、2.0 cm的组织之间该蛋白的表达无显著性差异。结论1、AQP1、AQP5在PA的发生发展中起着重要作用。2、AQP1、AQP5可作为确定PA手术安全边界的参考指标。3、AQP1、AQP5作为外科手术安全边界的参考指标较Ki67更灵敏。