福建疣孢霉菌生物学特性与种群分化研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:chcongcong520
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本文对福建省14个主要双孢蘑菇产区疣孢霉菌的生物学特性、分子标记遗传分析、对杀菌剂的敏感性及对不同双孢蘑菇菌株菌丝和子实体的侵染性进行测定。疣孢霉菌的生物学特性研究包括对菌落特征、菌丝形态、孢子大小等形态学特征的观察比较。比较不同疣孢霉菌株适宜的生活条件,包括温度、pH和不同培养基(PDA和蔡氏培养基)对菌丝生长的影响。结果表明:供试菌株有三种茵落形态,厚垣孢子和分生孢子大小、颜色有较大差别。各菌株最适生长温度和最适pH差别不大,最适生长温度在24-26℃之间,最适pH在5-5.5之间。有13个菌株在PDA培养基上生长速度比在蔡氏培养基上生长速度快。DNA分子标记由于检测手段简单、高效,渗透到许多领域,在遗传育种研究、检测和基因克隆、研究种间的遗传多样性和确定遗传关系都有广泛应用。我们应用RAPD、ISSR和SRAP标记对16个疣孢霉菌株进行种质资源研究。采用ITS测序技术对疣孢霉进行种的区分。采用这三个分子标记分别对16个疣孢霉菌株进行聚类分析,建立聚类图,可将16个菌株分为三个类群。对莆田地区和漳州地区进行较大规模的采样分析发现:莆田地区存在三个类群,漳州存在两个类群。ITS测序结果表明:各菌株的ITS序列相似性达到98%,所以可判断这16株疣孢霉菌株可能为同一个种的不同生理小种,而不是疣孢霉菌属的不同种。鉴于疣孢霉有不同的生理小种,本试验选择了五种常用杀菌剂多菌灵、特克多、施保功、代森锌、代森锰锌对三类疣孢霉菌丝生长、分生孢子萌发进行了进行室内毒力测定。结果表明:Ⅰ类疣孢霉菌丝对施保功较敏感,其半数影响浓度(50%effective concentration,EC50)和90%影响浓度(90%effectiveconcentration,EC90)分别是0.024 mg·L-1和0.93 mg·L-1,而分生孢子对代森锰锌较敏感,其EC50和EC90分别是24.66 mg·L-1和305.47 mg·L-1;Ⅱ类疣孢霉菌丝和分生孢子均对特克多敏感,其对菌丝生长的EC50和EC90分别是0.09mg·L-1和0.36 mg·L-1,对分生孢子萌发抑制的EC50和EC90分别是0.16 mg·L-1和3.70 mg·L-1;Ⅲ类疣孢霉菌丝对特克多敏感,其EC50和EC90分别是0.096mg·L-1和0.24 mg·L-1,而分生孢子对多菌灵敏感,其EC50和EC90分别是29.27mg·L-1和49.19 mg·L-1。本文选取29株双孢蘑菇菌株进行疣孢霉菌侵染双孢蘑菇菌丝的实验,选取9个双孢蘑菇菌株进行出菇试验,测定子实体对疣孢霉菌的抗性。结果表明:气生型菌株0042(A.s0011)其菌丝与疣孢霉菌丝不产生拮抗现象,但是,其子实体对三个类群的疣孢霉菌均有抗性。176(A.s0003)和7601(A.s0005)子实体对Ⅰ类和Ⅲ类疣孢霉菌均产生抗性,产生正常的子实体,但对Ⅱ类疣孢霉菌无抗性。其它菌株均严重感病,子实体畸形,腐烂,或不产生子实体。双孢蘑菇子实体对疣孢霉的抗性与双孢蘑菇菌丝体的类型无相关性,即双孢蘑菇菌丝体对疣孢霉菌有抗性其子实体不一定有抗性。
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