不同产地丁香中总黄酮和挥发性物质的比较研究

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丁香Eugenia caryophyllata Thunb.为桃金娘科蒲桃属植物丁香的干燥花蕾,习称公丁香。丁香不仅是世界名贵的香料植物,还是一种临床常用药物,是我国传统进口“南药”之一。本品辛、温,归脾、胃、肺、肾经。具有温中降逆、补肾助阳的功效。主治脾胃虚寒、呃逆呕吐、食少吐泻、心腹冷痛、肾虚阳痿等症。主产于坦桑尼亚、马来西亚、印度尼西亚等地,我国自上世纪50年代开始对丁香进行引种栽培,并取得初步成功,但是国产丁香与进口丁香的差异性研究仍处于空白。丁香具有强抗氧化作用,其所含的黄酮和挥发油是其发挥抗氧化作用的主要药效成分。本课题分别对来自印尼、广东、云南、广西以及海南5个不同产地丁香中的总黄酮及挥发性物质进行比较研究,以期为国产丁香和进口丁香药材质量的差异性和均一性综合评估提供科学依据,对从有效成分方面阐明中药材道地性的科学内涵具有重大意义。黄酮类成分具有良好的抗氧化及清除自由基作用,为探讨药材产地对丁香药材质量的影响,本课题采用紫外分光光度法,以山奈酚为对照品,对印尼、广东、广西、云南、海南5个不同产地丁香药材中的总黄酮含量进行了测定研究。为准确鉴别不同产地丁香药材质量的优劣,本课题以丁香酚作为含量测定的指标性成分,采用高效液相色谱法,对5个不同产地丁香中丁香酚的含量测定进行了实验研究,该方法具有操作简便,分析快速准确,干扰小等特点,为有效控制产品质量提供参考。丁香挥发油具有较强的抗氧化作用,丁香酚和丁香油是有效的自由基清除剂。为了研究丁香中挥发性物质的化学组成,本课题选取饱和氯化钠溶液作为盐析的介质,采用正交设计法对丁香挥发油的提取工艺进行优化,优选出水蒸气蒸馏法(SD)提取丁香挥发油的最佳工艺为:药材粉碎过三号筛,加70倍量的水,超声处理40min,提取时间为6h。本课题按照优化后的丁香挥发油提取方法结合气质联用技术分别对不同产地(印尼、广东、云南、广西、海南)丁香挥发油化学成分进行了比较研究,结果发现不同产地丁香药材挥发油化学成分中共有成分有7个,依次为水杨酸甲酯、对烯丙基苯酚、丁香酚、石竹烯、α-律草烯、氧化石竹烯、邻苯二甲酸二乙酯,占各自挥发油总量的78.92%(印尼)、75.04%(广东)、78.46%(云南)、73.4%(广西)以及74.88%(海南)。采用顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气质联用色谱法(GC-MS)对丁香挥发性成分进行分析,以样品取样量、萃取纤维头类型、萃取温度、萃取时间和解吸时间为考察因素,确定顶空固相微萃取的最佳条件为:取样品粉末0.05g置样品瓶中,插入装有65μm PDMS-DVB萃取纤维头的手动进样器,50℃下平衡5min,萃取3min,解吸3min。本课题按照优化后的顶空固相微萃取方法结合气质联用技术分别对不同产地(印尼、广东、云南、广西、海南)丁香挥发性物质进行了比较研究,结果发现不同产地丁香药材挥发性物质中共有成分有5个,依次为α-蒎烯、丁香酚、石竹烯、α-律草烯、δ-杜松烯,分别占各自挥发性物质总量的99.46%(印尼)、99.43%(广东)、99.30%(云南)、99.43%(广西)以及99.53%(海南)。
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