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迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda)是危害水产养殖业的重要病原菌,该菌引起的疾病在世界海水、淡水养殖动物中普遍流行,带来严重的经济损失。目前消毒剂、抗生素等仍是预防和治疗爱德华菌病的主要方法,但存在细菌耐药性、食品药物残留等问题。细菌菌蜕是通过调控噬菌体Phi X174的裂解基因E在革兰氏阴性菌中的表达而形成的无细胞浆和繁殖能力的细菌空壳,没有活菌的致病作用,同时菌蜕包含的LPS、类脂、肽聚糖等天然的免疫刺激复合物,具有天然的佐剂性质,能诱导更强的免疫反应,也符合环境无污染、水产食品无药物残留等优点,因此菌蜕疫苗是比常规疫苗更理想的新型疫苗体系。为了研究迟缓爱德华菌菌蜕疫苗对罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫保护效果,本试验首先利用构建的裂解质粒载体通过高温诱导制备了迟缓爱德华菌菌蜕疫苗,利用腹腔注射、口服两种途径免疫罗非鱼,定期采集血清、头肾、脾脏,分别检测了血清抗体水平,血清中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)三种酶活性和头肾、脾脏中IL-1、IFN、TNF、Caspase3的相对表达量;并通过攻毒试验计算了菌蜕疫苗、福尔马林灭活疫苗两种疫苗的相对免疫保护率。抗体检测结果表明,菌蜕疫苗免疫组、灭活疫苗免疫组抗体水平显著高于对照组(P<0.01),菌蜕疫苗免疫组抗体水平高于灭活疫苗免疫组,差异不显著,但免疫后21天和28天,菌蜕疫苗注射组抗体水平显著高于灭活疫苗免疫组(P<0.05);酶活力检测结果证实,菌蜕疫苗组的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活力差异不显著,但菌蜕疫苗注射组的超氧化物歧化酶活力显著高于灭活疫苗口服组和对照组(P<0.05);荧光定量检测结果表明,菌蜕疫苗注射组头肾中IL-1的相对表达量显著高于对照组(P<0.01),免疫28天,菌蜕疫苗组头肾中IL-1、IFN、TNF、Caspase3的表达量和脾脏中Caspase3的表达量高于福尔马林灭活疫苗组,均显著高于对照组(P<0.05);免疫保护率结果表明,菌蜕疫苗注射、口服组的相对保护率分别为79%、77%,福尔马林灭活疫苗组的相对保护率分别为62%、60%,免疫保护率均显著高于对照组(P<0.05)。综上可以看出,菌蜕疫苗比福尔马林灭活疫苗更能有效激活机体的免疫应答。菌蜕疫苗可开发成预防迟缓爱德华菌病的候选疫苗。