相思树(Acacia spp.)若干种类的离体培养及其内源激素变化研究

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本研究以流苏相思(Acacia. fimbriata)、多花相思(A. floribunda)、厚荚相思(A. crassicarpa)、薄荚相思(A. leptocarpa)、台湾相思(A. confusa)、黑木相思(A. melanoxylon)、灰木相思(A. implexa)、珍珠相思(A. podalyriifolia)的成熟种子、未成熟种子、无菌苗为试验材料,对不同种类相思树成熟种子和未成熟种子的无菌萌发进行研究,对不同种类相思树无菌苗的离体繁殖条件进行优化,对不同种类相思树不同来源的材料进行愈伤组织的诱导和植株再生的研究,对不同种类相思树离体生根进行研究,对相思树试管苗生根过程的内源激素进行测定。主要研究结果如下:1不同种类相思树种子的无菌萌发以浓硫酸25 min+沸水浸泡20 min的处理方式处理流苏相思(Acacia. fimbriata)、多花相思(A. floribunda)、厚荚相思(A. crassicarpa)、黑木相思(A. melanoxylon)、灰木相思(A. implexa)、台湾相思(A. confusa)的成熟种子,发现不同种类相思树种子的萌发率之间存在着差异,多花相思的种子萌发率为33.3%,台湾相思不能萌发,其余相思树种子的萌发率均在70%以上;且萌发率随保存时间的延长而降低。添加活性炭有利于相思树未成熟种子的萌发。2不同种类相思树无菌苗离体繁殖条件的优化以流苏相思(Acacia. fimbriata)、多花相思(A. floribunda)、厚荚相思(A. crassicarpa)、薄荚相思(A. leptocarpa)、台湾相思(A. confusa)的无菌苗为材料进行离体培养的研究,发现在相同培养条件下,不同种类相思树无菌苗的长势存在差异。对薄荚相思、厚荚相思、台湾相思的无菌苗进行离体培养,发现薄荚相思在1/2MS+BA 0.4 mg·L-1+AC 2.0 g·L-1+香蕉匀浆物50 g·L-1+蔗糖20 g·L-1的培养基上薄荚相思生长旺盛,未出现玻璃化现象,且根系生长健壮;厚荚相思在MS+BA 3.0 mg·L-1 +NAA 0.2 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1+椰汁100 ml·L-1的培养基上,丛生芽的诱导率为79%,且玻璃化率较低;台湾相思在MS+BA 2.0 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1+GA3 0.5 mg·L-1+AC 1.0 g·L-1的培养基上增殖系数较大。以厚荚相思、黑木相思、灰木相思子叶节部位为材料,发现在MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1的培养基上进行丛生芽诱导的研究,发现子叶节部位是诱导丛生芽的理想材料。3不同种类相思树愈伤组织的诱导及植株再生以流苏相思(Acacia. fimbriata)、多花相思(A. floribunda)、珍珠相思(A. podalyriifolia)、台湾相思(A. confusa)无菌苗的下胚轴,流苏相思(A. fimbriata)、多花相思(A. floribunda)、厚荚相思(A. crassicarpa)、薄荚相思(A. leptocarpa)、台湾相思(A. confusa)无菌苗的叶片,黑木相思(A. melanoxylon)、灰木相思(A. implexa)的无菌苗为材料,进行愈伤组织的诱导及植株再生的研究,发现取材部位和基因型影响愈伤组织的诱导和植株再生。4不同种类相思树的生根培养以流苏相思(Acacia. fimbriata)、多花相思(A. floribunda)、厚荚相思(A. crassicarpa)、薄荚相思(A. leptocarpa)、台湾相思(A. confusa)的无菌苗为材料,进行生根的研究,发现1/2MS+NAA 2.0 mg·L-1,有利于流苏相思的生根,虽然主根数、侧根数不是最高,但是生根率达到80%以上;MS+NAA 2.0 mg·L-1+ABT1 1.0 mg·L-1有利于多花相思的生根,生根率88%,且主根数、侧根数最多;MS+NAA 2.0 mg·L-1+IBA 1.5 mg·L-1有利于厚荚相思的生根,生根率在90%以上,且主根数、侧根数较多;1/2MS+NAA 2.0 mg·L-1有利于薄荚相思的生根,生根率在90%以上,且主根数、侧根数较多;台湾相思在1/2 MS+IBA 1.5 mg·L-1的培养基上生根率较高,但是只有32.5%。相思树的生根能力和生根潜能受遗传控制,基因型影响相思树的生根。5相思树悬浮细胞系的建立以珍珠相思浅黄色松散型生长旺盛的愈伤组织为材料,发现适宜的起始培养密度为每瓶0.5 g,首次建立珍珠相思的悬浮细胞系。6相思树试管苗内源激素的HPLC测定以流苏相思(Acacia. fimbriata)、多花相思(A. floribunda)、厚荚相思(A. crassicarpa)、薄荚相思(A. leptocarpa)、台湾相思(A. confusa)的试管苗为材料,进行相思树内源激素的提取,建立了相思树内源激素的测定方法,并对不同种类相思树内源激素进行测定。研究发现不同种类相思树内源激素含量不同;相思树在生根过程中内源激素的动态变化比含量对生根的作用更为重要。总之,本研究对不同种类相思树的离体培养进行了较为系统的研究,首次建立珍珠相思的悬浮细胞系,对相思树离体快繁和生物技术育种具有重要意义;率先应用HPLC测定方法对不同种类相思树试管苗的内源激素进行测定,为相思树离体培养外源激素的合理添加提供理论指导,为探索相思类树种离体培养的发育和调控等基础理论问题提供理论依据。
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