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第一部分:不同亚型的肾病儿童肾组织中microRNAs的差异表达背景:课题组前期研究发现在儿童肾病综合征患者的血清或者尿液中存在一组上升的miRNAs。本研究检测了这些miRNAs在儿童肾病患者肾组织中的表达水平并探讨其在儿童肾病发病机制及作为潜在指标区分肾脏疾病亚型方面的作用。方法:收集52例患有六种不同肾病亚型的儿童肾组织作为病人组,且以8例正常肾组织作为对照组。利用 RT-qPCR 技术检测 miR-191、miR-151-3p、miR-150、miR-30a-5p 和miR-19b在肾组织中的表达水平。结果:相比于正常组,miR-191和miR-151-3p分别在六种肾病亚型中都显著升高或者降低。miR-19b在三种亚型中上调,而miR-30a-5p和miR-150分别在两种和四种亚型中下调。微小病变(MCD)患者肾组织中miR-150的表达显著异常于其他肾病亚型。这些miRNAs的肾组织表达水平与一些肾功能和免疫因素密切相关。生物信息学分析表明这些miRNAs的靶基因与免疫和肾脏病理变化相关。结论:这五种miRNAs可能参与儿童肾病的发病机制。miR-150是区分MCD和其他肾病亚型的潜在的分型指标。第二部分:不明原因发热病人血清中人巨细胞病毒 microRNAs 表达谱的综合表征背景:不明原因发热(Fever ofunknown origin,FUO)的病因多种多样,其诊断已经成为临床上的巨大挑战。人巨细胞病毒(HCMV)感染是多种疾病发展的病因,然而HCMV与FUO在临床上的相关性和重要性很少被研究。本研究旨在对FUO病人血清中HCMV编码的miRNA表达谱进行综合分析并进一步评估其在疾病监测和预防方面的临床意义。方法:本研究收集109例FUO病人血清样本及106例年龄、性别与之相匹配的正常人血清样本作为正常对照。采用反转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测已知的24种HCMV miRNAs的血清浓度。采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血清中抗HCMV IgG和IgM抗体。结果:RT-qPCR检测发现,相比正常人,FUO患者血清中8种HCMV miRNAs,包括Hcmv-miR-US4-3p、Hcmv-miR-US29-3p、Hcmv-miR-UL70-5p、HCMV-miR-US5-2-5p、HCMV-miR-5-2-p、Hcmv-miR-UL148d、Hcmv-miR-UL112-3p 和 Hcmv-miR-US25-2-3p 的表达水平显著上升(P<0.05)。逻辑回归分析表明,这8种HCMV miRNAs是FUO新的潜在危险因素。Spearman秩相关分析表明这8种HCMV miRNAs与血液C反应蛋白(CRP)浓度显著相关。另外,抗HCMV IgG抗体在病人和正常人血清中阳性率分别为94.3%和92.8%。结论:8种表达上调的HCMV miRNAs可能是FUO的潜在危险因素且为进一步监测FUO提供了有用的信息。