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近年来科学家提出“饿死癌细胞”的理论,而血管新生是癌细胞摄取营养的主要途径。如果将此途径阻断将达到治疗癌症的效果。因此,寻找有效的抗血管新生药物已成为治疗癌症的新靶点。本研究前期结果表明七鳃鳗口腔腺富含半胱氨酸分泌蛋白（cysteine-rich buccal gland protein,CRBGP）能够在鸡胚尿囊膜模型内抑制由碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,b FGF）诱导的血管新生。由于CRBGP主要由PR-1（pathogenesis-related group 1 domain）和CRD（cysteine-rich domain）两个功能结构域组成,那么CRBGP的抗血管新生活性是与其PR-1结构域、还是CRD结构域有关,亦或者是两个结构域的协同作用?为了深入阐明CRBGP各结构域与其抗血管新生活性的关系,本研究构建了p ET42a-L-PR-1和p ET42a-L-CRD原核表达载体,获得了具有生物学活性的重组结构域蛋白（r L-PR-1和r L-CRD）。MTT结果表明r L-PR-1能够以剂量依赖性的方式显著抑制人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）的增值,其IC50为2μM。而r L-CRD对HUVECs的增值没有明显的抑制作用。这意味着PR-1是CRBGP抗血管新生活性的主要功能结构域。因此后续研究主要分析PR-1结构域（r L-PR-1）对HUVECs功能的影响。乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活性分析结果表明r L-PR-1能够破坏HUVECs的细胞膜并释放LDH,但是活性较弱。这表明r L-PR-1对HUVECs较弱的毒性也是抑制其增值的因素之一。Hoechst 33258染色结果显示r L-PR-1能够促使HUVECs内染色质发生固缩。这表明r L-PR-1能够诱导HUVECs发生凋亡。本研究通过免疫荧光和western blot的方法证实了r L-PR-1是通过改变细胞骨架的排列和线粒体凋亡途径相关蛋白的表达水平来诱导HUVECs发生凋亡。此外,粘附实验结果表明r L-PR-1能够通过竞争性结合整合素来抑制HUVECs粘附到细胞外基质蛋白,如胶原IV、纤连蛋白以及层粘连蛋白。这表明r L-PR-1能够识别多种类型的整合素分子。同时,Transwell和western blot实验结果表明r L-PR-1能够通过下调基质金属蛋白酶2（Matrix metallopeptidase 2,MMP2）的表达水平来抑制HUVECs的迁移及浸润过程。最后,小管形成实验结果表明r L-PR-1能够在体外抑制HUVECs分化形成小管结构。综上,r L-PR-1具有抗血管新生活性。本研究对于进一步阐明富含半胱氨酸分泌蛋白家族成员（如七鳃鳗CRBGP）的生物学功能和作用机制奠定了基础。