本文从牙鲆中克隆到其肌肉调节因子myogenin和MRF4的基因,并对它们的表达、启动子活性及功能进行分析。研究结果表明牙鲆myogenin和MRF4都由三个外显子和两个内含子组成,其cDNA编码的氨基酸序列分别与几种鱼类的同源基因亲缘关系较近。原位杂交显示最早在胚胎5-6个体节时体节中部的细胞检测到myogenin的表达,随着发育的进行,它的表达向体节两侧和体后延伸,最后在整个体节表达。当发育到30个体节的时候,在躯干的表达迅速下降,只在胚胎的尾部能检测到信号。RT-PCR的结果显示,MyoD和Myf5的表达要早于myogenin,而MRF4的表达晚于myogenin,并且myogenin、MRF4只在成鱼的肌肉中表达,这进一步证明其在肌肉发育过程中的作用。myogenin和MRF4的启动子中含有保守的肌肉特异调控序列,瞬时表达分析的结果证实两段启动子序列足以驱动GFP在斑马鱼胚胎肌肉中的特异表达。首次对鱼类MRF4启动子进行了调控序列的分析,发现在启动子的-181到-506的序列中含有调节MRF4表达的必需位点。首次应用原核表达系统对MRF4蛋白进行重组表达,并利用纯化的重组蛋白制备多克隆抗体,通过western杂交分析显示所得到的MRF4多克隆抗体能够识别牙鲆内源性的MRF4蛋白。