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目的:测定单混提法制备的复方葛根片中主要有效物质含量,阐明复方葛根片对心血管衰老的保护作用及其机制。方法:采用SHIMADZU VP-ODS柱(250mm×4.6,5um),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为0.9ml/min,柱温30℃。采用皮下注射D-半乳糖的方法制备大鼠衰老模型,将50只wistar雄性大鼠按体重随机分成正常组,模型组,复方葛根片高,中,低剂量组,45d后运用AU5800全自动生化仪测定血清中同型半光氨酸(Hcy)的含量;用黄嘌呤法测定各组大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性;用比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性;用TBA法测定丙二醛(MDA)的含量;取胸主动脉制作病理切片;TUNEL法检测心肌细胞的凋亡率;JC-1染色法检测心肌细胞线粒体膜电位变化;运用统计学软件spss16分析各组hcy含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性、体重、心肌细胞的凋亡率,JC聚合物百分含量的差异;对大鼠胸主动脉进行HE染色,在光镜下观察血管的组织病理学病变,扫描电镜观察心肌的微观结构。结果:葛根素,大豆苷的质量浓度在15.2-236.8ug/ml,2.5-12.5ug/ml范围内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.4%,98.7%,RSD分别为2.36%,3.14%(n=6),回归方程分别为y=5993.21407x-376.78985,y=6146 x+73.62。相关系数分别为0.9994,0.9993。模型组与正常组,各给药组与模型组的Hcy水平、体重均存在显著性差异(P<0.01),各组大鼠血清中的SOD,GSH-PX,MDA水平均两两差异显著(P<0.05),各组大鼠心肌细胞的凋亡率均两两差异显著(P<0.05),各组大鼠心肌细胞中JC聚合体的百分率均两两差异显著(P<0.05),模型组血管组织结构病变严重,各给药组出现不同程度的改善。结论:建立的该方法简单,准确,重复性好,为完善复方葛根片的质量控制提供了可靠依据。D-半乳糖能升高衰老大鼠血清中的Hcy含量。D-半乳糖致大鼠衰老模型可以用来做血管衰老的实验研究,复方葛根片对大鼠血管的氧化应激具有很好的保护作用。复方葛根片能降低D-半乳糖致衰老大鼠血清中的Hcy水平并对血管结构具有保护作用。复方葛根片能减少心肌细胞的过度凋亡。复方葛根片具有维持心肌细胞线粒体膜电位稳定的作用。